近日受國家政策影響，內(nèi)毒素檢測試劑所用原料鱟（中國鱟及圓尾鱟）被列為國家二級保護(hù)動物（國家林業(yè)和草原局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2021年2月25日公告（2021年第3號））。

意味著內(nèi)毒素檢測試劑原料將受到嚴(yán)格管控，目前使用的東方鱟試劑將面臨被斷供的風(fēng)險(xiǎn)，國內(nèi)藥品、醫(yī)療器械放行將面臨困境。

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法目前現(xiàn)行有兩大類方法，即凝膠法和定量法，后者還包括濁度法、顯色基質(zhì)法和重組C因子（rFC）檢查法。

凝膠法提供了一種簡單的陽性/陰性結(jié)果判斷，定量法需要借助酶標(biāo)儀設(shè)備，讀取樣品與鱟試劑/rFC作用后吸光值/熒光值的變化，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品內(nèi)毒素的含量，以量來評估是否可以放行。

目前中國藥典、美國藥典、歐洲藥典、日本藥典等都接受基于鱟試劑的膠凝法和定量法。

rFC作為一種合成試劑，可以替代來源于鱟血液的美洲鱟試劑（LAL）和東方鱟試劑（TAL）用于內(nèi)毒素檢測。rFC試劑的主要優(yōu)點(diǎn)是提高了一致性和可持續(xù)性。FDA現(xiàn)已批準(zhǔn)rFC因子作為鱟試劑的替代方案，用于生物制品的放行和過程檢測。歐盟和日本法規(guī)也均已采納rFC試劑。2020年版中國藥典通則9301附錄里面也有關(guān)于重組C因子的檢測說明，但是如需放行檢測，還需要做相關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)。

Lonza的重組C因子（rFC）和美洲鱟試劑(LAL)可以幫助客戶渡過即將到來的難關(guān)，再結(jié)合合規(guī)、易用而功能強(qiáng)大的內(nèi)毒素檢測分析軟件WinkQCL，酶標(biāo)儀，自動化的PTP工作站，可以讓內(nèi)毒素檢測既高效快速又無其他問題。

2020年5月美國藥典將rFC作為獨(dú)立章節(jié)引入U(xiǎn)SP-NF，將鱟試劑的替代品-重組C因子（rFC）作為獨(dú)立章節(jié)引入U(xiǎn)SP-NF。該通告旨在為細(xì)菌內(nèi)毒素檢測引入更多的方法，這對于疫苗和其他注射藥物的生產(chǎn)至關(guān)重要。

USP還向病毒（COVID-19）疫苗和治療藥物的提供了有關(guān)rFC檢測的指南草案，同時(shí)表示將繼續(xù)于制定與rFC有關(guān)的獨(dú)立藥典標(biāo)準(zhǔn)。

Lonza PyroGeneTM重組C因子試劑盒是內(nèi)毒素檢測方法的發(fā)展成果。通過體外重組鱟凝血級聯(lián)反應(yīng)的個(gè)組分：C因子，重組C因子法只需一部反應(yīng)，優(yōu)于傳統(tǒng)LAL法且不依賴動物源成分-鱟血。

PyroGeneTM重組C因子法，激活的C因子直接剪切一個(gè)熒光底物，產(chǎn)生的信號被熒光酶標(biāo)儀識別。由于熒光信號的動態(tài)范圍大，相較于傳統(tǒng)的動態(tài)LAL法，PyroGeneTM重組C因子法只需一步反應(yīng)，檢測范圍即可達(dá)到5.0EU/ml – 0.005 EU/ml。