上一期文章我們總結(jié)了“物、化、生"三大類(lèi)轉(zhuǎn)染法的優(yōu)劣勢(shì)，總結(jié)如下：

本期我們將深入了解電穿孔法中，目前在Google Scholar已有42,100+篇文獻(xiàn)所提及的Nucleofector™技術(shù)，消化完本文后文末有答題活動(dòng)，獎(jiǎng)項(xiàng)豐富，為你的開(kāi)學(xué)季更添助力！

前情提要

1998年，Nucleofector™技術(shù)由Amaxa公司開(kāi)發(fā)（該公司于2008年被Lonza收購(gòu)），并于2001年成為廣大科研人員可以使用的技術(shù)（Nucleofector™ I/II/IIb）。該技術(shù)基于電脈沖在細(xì)胞膜上瞬間產(chǎn)生小孔，綜合Lonza轉(zhuǎn)染體系（即細(xì)微差別的電脈沖條件和細(xì)胞特異性試劑的組合），使核酸底物可以直接進(jìn)入細(xì)胞核，讓細(xì)胞的最高轉(zhuǎn)染效率可以達(dá)到99%，細(xì)胞轉(zhuǎn)染不依賴于細(xì)胞的增殖分裂。隨后，Lonza在2010年推出新一代電轉(zhuǎn)染系列4D Nucleofector™，并且在2021年推出第二代4D Nucleofector™核轉(zhuǎn)染平臺(tái)。

隨著系統(tǒng)生物學(xué)與交叉學(xué)科方法的應(yīng)用，要求細(xì)胞和系統(tǒng)模型越來(lái)越接近體內(nèi)細(xì)胞的功能。Nucleofector™技術(shù)就是為了嘗試從根本上解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率與成活率問(wèn)題，無(wú)論是原代細(xì)胞（干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、免疫細(xì)胞等），還是細(xì)胞系，每次都可重復(fù)出很高的轉(zhuǎn)染效率。

在Google Scholar用“Nucleofector"來(lái)檢索，已經(jīng)有42,100+篇文獻(xiàn)提及Nucleofector™技術(shù)。檢索Nucleofector+“CRISPR"，一共有12,800+篇，數(shù)量每日遞增中。

化學(xué)頂級(jí)綜述雜志Chemical Reviews文章對(duì)Nucleofection™技術(shù)的評(píng)價(jià)是：

Nucleofection™技術(shù)是有史以來(lái)電轉(zhuǎn)系統(tǒng)之一，于21世紀(jì)初問(wèn)世，作為一種有效的細(xì)胞內(nèi)遞送方法迅速獲得普及。

Lonza 4D Nucleofector™平臺(tái)從實(shí)際需求出發(fā)，開(kāi)發(fā)了從低通量到高通量，小體積到大體積的電轉(zhuǎn)染，研發(fā)到生產(chǎn)規(guī)模的設(shè)備型號(hào)，保證從小體系篩選到大規(guī)模電轉(zhuǎn)的可行性和放大工藝可轉(zhuǎn)移。包括如下功能模塊并匹配對(duì)應(yīng)應(yīng)用方向：

并且只需5步簡(jiǎn)單的操作方案，

即可實(shí)現(xiàn)輕松電轉(zhuǎn)！

4D-Nucleofector™ 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)，除了電轉(zhuǎn)儀設(shè)備本身之外，還有不同細(xì)胞專屬的電轉(zhuǎn)試劑，可以支持在不同類(lèi)型的細(xì)胞中都可以實(shí)現(xiàn)高效的，同時(shí)維持細(xì)胞功能的轉(zhuǎn)染結(jié)果。該系統(tǒng)改進(jìn)了傳統(tǒng)金屬電極材質(zhì)的電極杯，通過(guò)一種技術(shù)利用高分子導(dǎo)電聚合物穩(wěn)定電脈沖發(fā)生的過(guò)程，避免金屬離子釋放對(duì)細(xì)胞本身帶來(lái)的金屬離子毒性影響。在Lonza BioscienceKnowledge Center里面呈現(xiàn)了超過(guò)700種即用型protocol（包括細(xì)胞培養(yǎng)，傳代、電轉(zhuǎn)準(zhǔn)備、電轉(zhuǎn)方案、孵育方法以及優(yōu)化方案）及海量的資料和應(yīng)用FAQ（且一直在實(shí)際各地技術(shù)團(tuán)隊(duì)的協(xié)作下不斷更新）。這也是Lonza電轉(zhuǎn)產(chǎn)品的又一個(gè)重要特色，讓大家在電轉(zhuǎn)系統(tǒng)的使用中輕松上手，實(shí)驗(yàn)操作無(wú)憂。