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逐典重組胰蛋白酶消化液 — 細(xì)胞解離更優(yōu)選擇
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統(tǒng)的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動物的胰臟提取獲得，曾被廣泛應(yīng)用于生物制品的生產(chǎn)。動物來源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風(fēng)險(xiǎn)，例如在上世紀(jì)60年代，曾發(fā)生脊髓灰質(zhì)炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件，2010年，某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環(huán)病毒序列。中國藥典2020版三部指出：“生物制品的原材料及輔料……應(yīng)盡可能選擇無病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)或低風(fēng)險(xiǎn)的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動物源 -
重組胰蛋白酶：特點(diǎn)解析及其在疫苗中的應(yīng)用價(jià)值
一，什么是重組胰蛋白酶？重組胰蛋白酶是指利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)，它是絲氨酸蛋白水解酶家族成員之一，屬肽鏈內(nèi)切酶，國際酶學(xué)編號為：EC3.4.4.4。二，胰蛋白酶的來源及水解特異性最初發(fā)現(xiàn)并使用的胰蛋白酶是從牛、羊、豬的胰臟提取的，其廣泛存在于在脊椎動物和微生物中，不同來源其最適溫度有所不同，其中哺乳動物源胰蛋白酶與人體最為相近。胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原合成場所，合成后作為胰液的成分而分泌，經(jīng)腸激酶或胰蛋白酶切去前導(dǎo)肽而形成具有活性的胰蛋白酶，為肽 -
背景目前，自身免疫性疾病主要由廣泛的免疫抑制劑和阻斷抗體治療，這些藥物可以控制疾病，但通常不能治愈。CAR-T療法是針對某些類型血癌的成熟治療方法，靶向CD19的嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞在B細(xì)胞惡性腫瘤中非常有效。同時，CD19CART細(xì)胞也靶向觸發(fā)自身免疫性疾?。ˋID）的自身反應(yīng)性B細(xì)胞，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、特發(fā)性炎癥性肌炎（IIM）和系統(tǒng)性硬化癥（SSc）。CAR-T細(xì)胞療法的下一個應(yīng)用會用于治療自身免疫性疾病嗎？或許在近期德國的一項(xiàng)相關(guān)性研究中能找到答案。如圖，B細(xì)胞在自身
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一，EGF簡介EGF的發(fā)現(xiàn)是由蒙塔爾奇尼（Montalcini）和科恩（Cohen）教授在純化小鼠頜下腺神經(jīng)生長因子(NGF)時發(fā)現(xiàn)一種可促進(jìn)新生小鼠提早開眼、長牙及對熱穩(wěn)定的多肽類物質(zhì)，此多肽物具有抑制胃酸分泌作用，稱為“抑胃素”，后發(fā)現(xiàn)“抑胃素”可直接促進(jìn)表皮生長，因此命名為表皮生長因子（EGF）。兩位生物學(xué)家，也因此獲得1986年的諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。1974年在人尿液中提純獲得人源表皮生長因子(hEGF)，其基因定位于4q25，由53個氨基酸構(gòu)成，分子量約6KDa，含有3個二硫鍵形成了3個分子
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在實(shí)驗(yàn)中大家經(jīng)常遇到這些問題：1.通過各種在線軟件進(jìn)行預(yù)測獲得miRNA靶向基因，但miRNA對靶基因的實(shí)際作用不清楚;2.又或者預(yù)測到轉(zhuǎn)錄因子對基因的表達(dá)起抑制或增強(qiáng)的作用，而具體活性以及結(jié)合位點(diǎn)仍然需驗(yàn)證;3.lncRNA或者circRNA吸附miRNA效果如何還未知。這個時候就需要用到熒光素酶(Luciferase)實(shí)驗(yàn)。熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中最有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為
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單細(xì)胞功能蛋白組學(xué)助力凱特和Carl June團(tuán)隊(duì)的Car-T研究
細(xì)胞治療臨床研究方案IsoPlexis單細(xì)胞功能蛋白質(zhì)組技術(shù)將單細(xì)胞技術(shù)和功能性蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)合起來采用微流控微室反應(yīng)和抗體條碼技術(shù)在單細(xì)胞水平對分泌的多種細(xì)胞因子和胞內(nèi)磷酸化蛋白組等在活細(xì)胞狀態(tài)下進(jìn)行高靈敏多重檢測分析，對功能蛋白進(jìn)行定性、定量，以此洞察單細(xì)胞功能異質(zhì)性。通過簡單易用的生信分析軟件對單細(xì)胞數(shù)據(jù)進(jìn)行自動分析，得到具有指導(dǎo)性的結(jié)果，幫助下一步?jīng)Q策。CD19CAR-T治療NHL臨床療效相關(guān)生物標(biāo)志物發(fā)表文章：Preinfusionpolyfunctionalanti-CD19chime -
使用Revvity VICTOR Nivo進(jìn)行細(xì)胞水平的HTRF檢測
在藥物研發(fā)過程中常用細(xì)胞學(xué)分析，來揭示化合物在體外誘導(dǎo)的效應(yīng)。本文中，我們將介紹使用VICTORNivo進(jìn)行細(xì)胞水平的HTRF檢測，分析α-微管蛋白乙酰化-K40水平。在人類神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，常發(fā)生微管蛋白乙?；?，因而被廣泛研究。αβ-微管蛋白異二聚體形成微管，微管是細(xì)胞骨架中的基本聚合物。通過翻譯后修飾（PTMs），細(xì)胞調(diào)節(jié)微管結(jié)構(gòu)和功能。α-微管蛋白在K40上的乙?；谄渌鸓TMs中起關(guān)鍵作用。已知抑制HDAC6（組蛋白去乙?；?）后，會使微管蛋白乙?；险{(diào)，我們采用了小鼠成纖維細(xì)胞（NIH -
去除核酸污染逐典生物耐高鹽全能核酸酶在150-900mM鹽濃度內(nèi)均保持高酶活
一，宿主DNA殘留控制的法規(guī)要求隨著生物醫(yī)藥行業(yè)的快速發(fā)展，越來越多的生物制品開始服務(wù)于人類健康，治療性抗體藥物、細(xì)胞治療、病毒載體疫苗等需求日益龐大。不同于傳統(tǒng)口服類藥物，大量生物制品通過注射等給藥方式直接進(jìn)入體內(nèi)，因此更需要嚴(yán)格的質(zhì)量監(jiān)管來保證生物制品的安全性和有效性。宿主核酸的殘留因其可能帶來的傳染性或者致瘤的風(fēng),險(xiǎn)而被作為生物制品安全監(jiān)管中的重要一項(xiàng)。WHO及世界各國對宿主核酸的殘留都有嚴(yán)格的規(guī)定如疫苗及治療類生物制品的DNA殘留量通常控制在100pg/劑量以下，部分產(chǎn)品甚至要求DNA殘
