前言：三七（Panax notoginseng，也稱 San Qi）是一種五加科植物 。它能夠影響血液循環(huán) ，是一種治療出血性疾病的傳統(tǒng)中草藥 [1]，也可以用作補(bǔ)品 。三七中的皂苷大約占其總重量的 8–12%。其主要生物活性成分三七總皂苷常用來治療冠心病 、心絞痛 、中風(fēng)和動(dòng)脈硬化[2，3]。三七總皂苷包含一些活性組分 ，如三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、Rb1、Re 和 Rd。皂苷的分析對于評價(jià)三七及其中藥制劑的質(zhì)量非常重要 。當(dāng)采用常規(guī)液相色譜柱 ，按照《中國藥典 》方法分析三七總皂苷時(shí)[4]，HPLC 運(yùn)行時(shí)間通常超過 60 分鐘 。安捷倫 Poroshell 120 EC-C18（2.7 µm）色譜柱填充了表面多孔填料 ，具有與亞 2 µm 全多孔填料色譜柱相似的性能 ，可以實(shí)現(xiàn)快速分離 ，并且柱壓低 。本應(yīng)用報(bào)告介紹了一種采用 Poroshell 120 EC-C18 色譜柱 ，在 Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng)上分析三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、Re、Rb1 和 Rd 的快速質(zhì)量控制方法 。與常規(guī)方法相比 ，該方法快速 、高效 、分離度高 ，溶劑消耗也大大減少 。

實(shí)驗(yàn)部分分析采用 Agilent 1290 Infinity 液相色譜系統(tǒng) ，包括一套二元泵（G4220A）、一個(gè)柱溫箱（TCC，G1316C）、一臺(tái)自動(dòng)進(jìn)樣器（G4226A）和一臺(tái)二極管陣列檢測器（DAD，G4212A）。色譜柱Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18，4.6 × 250 mm，5 µm（部件號 959990-902）Agilent Poroshell 120 EC-C18，4.6 × 75 mm，2.7 µm（部件號697975-902）

化合物目標(biāo)化合物及其結(jié)構(gòu)見圖 1。用 70% 的甲醇水溶液配制濃度為2.5 mg/mL 的樣品溶液 。三七總皂苷購于當(dāng)?shù)匾患抑兴幍?。稱取25 mg 樣品粉末置于 10 mL 容量瓶中 ，加 70% 的甲醇水溶液將其溶解并定容至刻度 。用 0.45 µm 再生纖維素膜過濾器（部件號5064-8221）對上述溶液進(jìn)行過濾 ，然后取濾液直接進(jìn)樣到 HPLC系統(tǒng) 。

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結(jié)果與討論采用安捷倫 ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6 × 250 mm，5 µm）色譜柱 ，按照 2010 年版《中國藥典 》中的方法測定三七總皂苷 。分離三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、Re、Rb1 和 Rd 用時(shí)約60 分鐘 。目標(biāo)化合物實(shí)現(xiàn)基線分離且峰形 良 好 。安捷倫Poroshell 2.7 µm 顆粒色譜柱具有與亞 2 µm 全多孔顆粒色譜柱相似的柱效 ，但柱壓更低 。采用安捷倫 Poroshell 120 EC-C18（4.6 × 75 mm，2.7 µm）色譜柱 ，可以快速實(shí)現(xiàn)方法的轉(zhuǎn)移和優(yōu)化 。如圖 2 所示 ，分析時(shí)間從 60 分鐘降至 18 分鐘 ，同時(shí)難分離組分對 Rg1 和 Re 的分離度得到改善 ，并且 Rg1 的理論塔板數(shù)更高 ，超過了 2010 年版《中國藥典 》的要求（N>6000）。采用安捷倫 Poroshell 120 EC-C18（4.6 × 75 mm，2.7 µm）色譜柱時(shí) ，柱壓低于 270 bar，非常適合在 400 bar 的 HPLC 上運(yùn)行 。另外 ，溶劑的消耗也大大減少 ，降低了分析費(fèi)用 。

結(jié)論采用安捷倫 ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6 × 250 mm，5 µm）色譜柱 ，按照傳統(tǒng)方法分析了三七總皂苷 。采用更短的安捷倫Poroshell 120 EC-C18 色譜柱可以大大縮短分析時(shí)間 ，并獲得更好的分離和峰形 ，從而節(jié)省大量時(shí)間和分析費(fèi)用 。安捷倫Poroshell 120 色譜柱的柱效超過了 2010 年版《中國藥典 》中分析三七總皂苷的相關(guān)要求 。本方法適用于評價(jià)三七及其中藥制劑的質(zhì)量 。