技術(shù)文章
液相色譜儀對a立哌唑的生產(chǎn)進(jìn)行過程控制
閱讀:377 發(fā)布時間:2023-4-10Agilent 1120 一體式液相色譜儀是常規(guī)分析型液相色譜選擇的系統(tǒng)。它是一款簡單易用、高性能、高可靠性的一體式液相色譜儀。由于保留時間和峰面積的精密度高,其非常適用于藥物生產(chǎn)的過程控制。本應(yīng)用報告表明:• 良好的保留時間精密度,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為(RSD) < 0.07 %。• 良好的峰面積精密度,基線分離峰的RSD < 0.25 %。
前言在活性藥物成分(APIs)的成產(chǎn)過程中,必須對前體或化學(xué)合成過程中所形成副產(chǎn)物的水平進(jìn)行監(jiān)測。為了保證符合標(biāo)準(zhǔn),生產(chǎn)者需要進(jìn)行若干分析,稱為過程分析。HPLC 是常采用的技術(shù),主要是因?yàn)樗梢詫⒋郎y物彼此分離,還能進(jìn)行定性和定量分析。建立的色譜方法必須在數(shù)年之內(nèi)可靠耐用。本研究的目的是建立阿li哌唑及其前體的HPLC 分析方法,該方法應(yīng)具有所需要的特異性和靈敏度。本應(yīng)用報告報導(dǎo)了用反相高效液相色譜法(RPHPLC)對阿li哌唑進(jìn)行過程控制的優(yōu)點(diǎn)。重點(diǎn)是可以在整個合
實(shí)驗(yàn)儀器Agilent 1120一體式液相色譜系統(tǒng)包括以下組件:• 低壓混合梯度泵• 含樣品盤的自動進(jìn)樣器• 柱溫箱,最長可容納250 mm的色譜柱• 可變波長檢測器 (VWD)
色譜柱采用Agilent TC(普通碳覆蓋率)C18(2) 柱,150 x 4.6 mm,5 µm粒度。儀器由安捷倫EZChromElite Compact Compliance軟件控制
本研究所用的是抗精神病藥物阿li哌唑及其兩個起始原料。1-(2,3) 六氫吡嗪鹽酸鹽(起始原料-1)和 7-(4-溴丁氧基)-3,4-二氫喹諾酮(起始原料-2)是合成阿li哌唑的兩個原料。合成路線如圖2所示。
樣品為了模擬過程控制藥物,我們制備了含各種濃度起始原料1、2和產(chǎn)物阿li哌唑的樣品。在反應(yīng)過程中,起始原料的濃度逐漸減小,而產(chǎn)物的濃度不斷增加。
色譜參數(shù)實(shí)驗(yàn)的目的是建立分析阿li哌唑及其相關(guān)化合物的最佳色譜條件。根據(jù)這些實(shí)驗(yàn),選擇了以下條件:• 樣品:1-(2,3-二lv苯基) 六氫吡嗪鹽酸鹽、7-(4-溴丁氧基)-3,4-二氫喹諾酮和阿li哌唑• 色譜柱:Agilent TC-C18,150 x 4.6 mm, 5 µm• 流動相:A = 水 + 0.2 % 三氟醋酸(TFA),B = 乙腈 + 0.16 % TFA (TFA 用于增加保留和改善峰形)• 流速:1.0 mL/min• 梯度:0 分鐘30 %B,7分鐘 70%B,并保持該比例2分鐘以上• 進(jìn)樣體積:5 µL• 帶清洗瓶(乙腈)的自動進(jìn)樣器編程,清洗針頭外部• 分析時間:9分鐘• 運(yùn)行后時間:5分鐘• VWD: 254 nm, 峰寬(PW)> 0.05 分鐘
序列表表1顯示了建立的序列表。從2號到 9 號樣品瓶,含各不同濃度的 3種化合物,每個樣品進(jìn)樣3次,以計算RSD。
結(jié)果與討論所建立的色譜方法能使所有化合物基線分離。圖 3 顯示了起始原料1 和 2 以及產(chǎn)物阿li哌唑的分離。分離時間為 9 分鐘,總分析時間(包括平衡)可在14分鐘以內(nèi),包括再平衡時間。
圖 4 顯示了反應(yīng)監(jiān)測分析的重疊圖譜。圖5是本系列最后的過程控制樣品三次進(jìn)樣,以及空白分析的重疊圖譜。過程控制樣品含阿li哌唑和占主化合物0.025%的起始原料1。圖中還顯示了起始物質(zhì)區(qū)域的放大圖譜。方法的精密度(RSD)用重復(fù)測定的標(biāo)準(zhǔn)偏差百分平均值表示。日內(nèi)精密度由對8個濃度水平標(biāo)準(zhǔn)混合物連續(xù)測定3次獲得。每個過程檢查樣品三次連續(xù)進(jìn)樣的保留時間和峰面積見表 2。峰面積的RSD小于0.25%。
結(jié)論本文建立了同時測定阿li哌唑及前體產(chǎn)物的 HPLC 方法。而且,還證明了該色譜方法可用于阿li哌唑合成的過程控制。Agilent1120一體式液相色譜系統(tǒng)是過程控制的良好選擇,因?yàn)樗梢蕴峁└叨戎貜?fù)的結(jié)果,即高精密度的保留時間和峰面積。在我們的應(yīng)用實(shí)例中,保留時間的精密度<0.06% RSD,基線分離峰的面積精密度< 0.23% RSD。