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多克隆抗體就是用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,刺激機體多個B細胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體后,所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體。由多種抗原決定簇刺激機體,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。
多克隆抗體與單克隆抗體的應(yīng)用比較
?。?)多克隆抗體的應(yīng)用
一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體,包括變性—抗性的表位,所以,在深固定的樣本中也會發(fā)揮效應(yīng),在石蠟包埋組織切片的染色中,多克隆抗體常選用。根據(jù)實驗的不同需要,多克隆抗體應(yīng)用于相應(yīng)抗原的標記。此外,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,多克隆抗體被用于農(nóng)藥殘留現(xiàn)場監(jiān)測;在臨床應(yīng)用中,多克隆抗體主要用于病原物的檢測、疾病的診斷及治療,如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應(yīng)和自身免疫病的治療。
?。?)單克隆抗體的應(yīng)用
單克隆抗體可用于分析抗原的細微結(jié)構(gòu)及檢驗抗原抗體未知的結(jié)構(gòu)關(guān)系;生產(chǎn)出針對復(fù)雜生物混合物中的特定分子的抗體,可用于分離、分析及純化該特定分子抗原;其試劑可用于臨床診斷和治療,或用于以單抗為彈頭的藥物,直接導向腫瘤等。自Mathe于1958年*將抗鼠白血病免疫球蛋白與氨甲喋呤(MTX)交聯(lián)用于導向治療以來,相繼出現(xiàn)了多種化療藥物與各種抗體的免疫耦合物,藥物與單抗直接交聯(lián)、藥物通過小分子交聯(lián)劑與單抗連接及藥物通過大分子載體與單抗相連形成免疫耦合物,促進了分子導向藥物的研制工作從實驗室走向臨床并廣泛應(yīng)用于疾病治療。
多克隆抗體與單克隆抗體的制備比較
多克隆抗體制備的主要流程包括:①制備抗原;②選擇實驗動物;③動物免疫;④試取血進行測試,看看是否成功免疫;⑤如果成功免疫,處死實驗動物,采集全部血清;⑥純化出抗體;⑦鑒定抗體,包括純度以及特異性。
與單抗制備的區(qū)別 經(jīng)過特定抗原處理過的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過細胞融合的方法得到雜交瘤細胞,經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選、ELISA檢測效價后就得到陽性克隆株,后進行細胞培養(yǎng)或?qū)⒓毎⑷氲絼游铮ㄒ话銥閎alb/c小鼠)腹腔中用腹水培養(yǎng),收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣,只需將抗原(純度越高越好)直接注入到動物體內(nèi)進行免疫,經(jīng)過3至4次免疫,ELISA測其效價合格后,收集血液離心得到上清,純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短,*制備價格也比單抗要低。