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CR1001-超級核酸酶(Benzonase Nuclease)
CR1001-超級核酸酶(Benzonase Nuclease)

地:北京

貨物所在地:北京北京市

更新時間:2024/11/8 21:00:07

訪問次數(shù):163

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供應(yīng)簡介
超級核酸酶(Benzonase Nuclease)是一種來源于粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens,也稱靈桿菌)的非特異性核酸內(nèi)切酶,也稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。該核酸酶可在非常寬泛的條件下降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA,產(chǎn)生長度為3至5個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。


詳細介紹

一、產(chǎn)品簡介


超級核酸酶(Benzonase Nuclease)是一種來源于粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens,也稱靈桿菌)的非特異性核酸內(nèi)切酶,也稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。該核酸酶可在非常寬泛的條件下降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA,產(chǎn)生長度為3至5個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。


超級核酸酶(Benzonase Nuclease)用途廣泛,可用于在重組蛋白、病毒疫苗、抗體藥物等生物制品生產(chǎn)過程中去除核酸,或用于降低細胞、組織、微生物等蛋白裂解液樣品的粘度等(可以用于化學(xué)破菌而省去超聲儀或高壓均質(zhì)機,或者結(jié)合化學(xué)破菌大幅度減少超聲儀或高壓均質(zhì)機的工作負荷)。


本產(chǎn)品采用我公司自主研發(fā)的技術(shù)平臺表達、純化和制備,分子量約為52.3kDa。超級核酸酶(Benzonase Nuclease)活性部分與Serratia marcescens中的天然核酸內(nèi)切酶氨基酸序列*一致。


二、產(chǎn)品性質(zhì)

來源

E. coli

分子量

52.3 kDa

純度

不小于 95% SDS-PAGE

等電點

6.19

酶活

不小于 200 U/μL

最適酶活 pH

8.0-9.2 (工作范圍 pH 6.0-10.0

最適酶活溫度

37℃ (工作范圍 0℃-42℃

最適輔助因子

2mM Mg2+ (工作范圍 1-10 mM

蛋白酶活性殘留

未檢出

保存緩沖液

10mM Tris (pH8.0), 500mM NaCl, 2mM MgCl2, 50% 甘油

活性單位定義

37℃ pH 8.0 反應(yīng)條件下,在 30 min 內(nèi)*消化 37 μg DNA 成為寡核苷酸的酶量(相當(dāng)于使 △A260 吸收值變化 1.0 )定義為一個活性單( U )。


三、產(chǎn)品用途


1)有效去除各種重組蛋白制備過程中的核酸殘留;

2)有效去除病毒疫苗和各種重組病毒中的核酸,以符合國家食藥監(jiān)局相關(guān)指南中關(guān)于核酸污染的要求;

3)有效降低細胞裂解液由于大量核酸存在而導(dǎo)致的粘度過大,以使裂解液易于后續(xù)操作;

4)有效降低大腸桿菌或其它工程菌裂解液粘度,大幅改善蛋白制備過程中菌體裂解液難過濾、難離心的問題,節(jié)約設(shè)備和人力成本;

5)在某些情況下,充分去除核酸可以提高包涵體蛋白的復(fù)性率;

6)在實時定量PCR測定重組病毒滴度時,用于去除病毒包裝細胞的核酸和包裝質(zhì)粒污染;

7)有效防止細胞成團,在細胞培養(yǎng)液中或某些細胞凍存液中加入適量超級核酸酶,可以防止細胞成團,以利于后續(xù)細胞分析和檢測。超級核酸酶沒有蛋白酶的活性殘留,本身也不會對健康細胞造成傷害,因此是防止細胞成團的理想選擇。

8)在二維凝膠電泳(2-DE)的過程中,加入核酸酶可以提高蛋白質(zhì)的分離效率和雙向電泳的分辨率。




四、產(chǎn)品效果

電泳圖.png



五、運輸和保存方法


低溫運輸(冰袋或干冰),-20℃保存,有效期3年。4℃保存一個月,酶活性沒有明顯變化。


六、常見化學(xué)試劑兼容條件

化學(xué)試劑

最佳條件

有效條件

DTT

0-100 mM

可以大于 100 mM

2-Mercaptoethanol

0-100mM

可以大于 100mM

Triton X-100

--

小于 0.4%

Urea

--

小于 5M

SDS

--

小于 0.05%

磷酸根離子

0-10 mM

0-100 mM

單價陽離子(如 Na + , K+ , NH4 +

0-20 mM

0-150 mM

(NH4)2SO4

--

小于 100mM


七、使用方法示例(去除細胞裂解上清中的核酸)


1、樣本準(zhǔn)備

大腸桿菌:離心收集菌體,用PBS或其它緩沖液清洗1次,8,000 rpm離心5 min,收集菌體沉淀。

貼壁細胞:去除培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞,去除上清。

懸浮細胞:離心收集細胞,用PBS清洗細胞,6,000 rpm離心10 min,收集細胞沉淀。


2、樣品處理

將收集到的菌體或細胞沉淀按照質(zhì)量(g)與體積(mL)比1:(10~20) 的比例進行裂解處理,可以在冰上或室溫通過機械或化學(xué)方法裂解細胞。


3、酶的添加

按照250 Units消化1 g細胞沉淀的比例添加超級核酸酶,也可以先進行預(yù)實驗自行選擇添加的酶量,在一定范圍內(nèi)增加酶量,消化所需時間相應(yīng)減少。


4、上清獲取

以12,000 rpm的轉(zhuǎn)速高速離心10-30min,去除沉淀,即獲得菌體或細胞裂解液上清,再進行后續(xù)相關(guān)實驗。



八、注意事項

1)若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應(yīng)適當(dāng)增加酶的用量或延長孵育時間。盡量按照上表“常見化學(xué)試劑兼容條件"表中的濃度范圍調(diào)整待處理樣品相關(guān)試劑的濃度,以使酶活性處于最大。

2)不建議-80oC保存本產(chǎn)品,也不建議反復(fù)凍融,有可能會降低產(chǎn)品的酶活性,可以適當(dāng)分裝保存于-20oC。



產(chǎn)品目錄


貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

目錄價格

CR1001

超級核酸酶

25KU

400

CR1002

超級核酸酶

50KU

680

CR1003

超級核酸酶

100KU

1300




本產(chǎn)品僅作為科研試劑使用!

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