Cystine,標(biāo)準(zhǔn)品

Cystine,標(biāo)準(zhǔn)品
CAS56-89-3
單位瓶
貨期4-6周
本公司主營試劑，原裝試劑，sigma ,自營品牌試劑，生化對照品，植物對照品，中藥對照品、進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品。價格實(shí)惠，質(zhì)量有保證，我們始終秉承“質(zhì)優(yōu)價廉，服務(wù)顧客"的原則，以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、周到的服務(wù)，期待與您的合作!

Cystine,標(biāo)準(zhǔn)品

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慢病毒感染快速指南

1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板，約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔，不同細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會不同，快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例，加入 500uL wan全培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒（接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時間不宜太長，否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選）。

3.加病毒量計算方法：（細(xì)胞數(shù)×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量見下表。同時加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，濃度為 10mg/mL Polybrene，細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL。

4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基，棄去培養(yǎng)基，每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。（注：如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%，請及時傳代培養(yǎng)）。

6.建議將 48 孔板細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代 12 孔板，后繼續(xù)觀察熒光，根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細(xì)胞生長良好，感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。（注：100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值，因?yàn)榭赡軙斐杉?xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高，影響細(xì)胞狀態(tài)。