DiI-Ac-LDL DiI標記乙酰化低密度脂蛋白

• 英文名稱 : DiI-Ac-LDL
• 儲存條件 : 2-8℃避光保存，請勿冷凍
• 純度 : 98%
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DiI-Ac-LDL DiI標記乙?；兔芏戎鞍?/strong>

DiI-Ac-LDL，即1,1’-雙十八酯基-3,3,3,,3,四甲基-吲哚碳菁高氯酸鹽標記的乙酰化低密度脂蛋白。它能用于鑒定和分離混合細胞群中的血管內(nèi)皮細胞和巨噬細胞。當細胞被DiI-Ac-LDL標記后，脂蛋白就會被溶酶體酶降解并且DiI（熒光探針）會積累在細胞內(nèi)膜中。標記了DiI-Ac-LDL的細胞生存活性不受影響。血管內(nèi)皮細胞純化培養(yǎng)物可以基于增加的代謝DiI-Ac-LDL利用熒光激活分類從復雜的初級培養(yǎng)物中進行分離。污染細胞（成纖維細胞、平滑肌細胞、周細胞、上皮細胞）將不會被標記。巨噬細胞能夠從混合的細胞群中（包括血管內(nèi)壁細胞）區(qū)分出來是因為它的標記更亮一些。

      標記有DiI-Ac-LDL的內(nèi)皮細胞較其它抗原標記的內(nèi)皮細胞有較多的優(yōu)勢。一旦細胞被標記， 熒光探針(DiI)將不會被胰蛋白酶移除掉。低密度和匯合培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細胞都將被高效的標記。其它類型的細胞標記水平均達不到血管內(nèi)皮細胞標記（除了巨噬細胞）。索萊寶公司DiI-Ac-LDL均通過牛主動脈內(nèi)皮細胞和小鼠巨噬細胞進行標記測驗以確保結(jié)果的*性。

實驗步驟：

      1. 在生長培養(yǎng)基中將DiI-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml；

      2. 將其加入到細胞中37 ºC溫育4小時；

      3. 去掉培養(yǎng)基；

      4. 用無探針的緩沖液沖洗；

      5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細胞通過胰蛋白酶（或者EDTA）進行分類。

      6. 熒光顯微鏡：用標準羅丹明激發(fā)進行觀察 （或者建議用波長激發(fā)：549nm、發(fā)射：565nm）。如果需要，用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進行固定，因為DiI溶于有機溶劑。（僅供科研使用）

注意事項：

      長時間的儲存后可能會產(chǎn)生沉淀，這種現(xiàn)象屬于正常情況。溶液放入離心管中離心2分鐘將沉淀除去即可。DiI-Ac-LDL不穩(wěn)定，實驗時hao現(xiàn)用現(xiàn)配，采用新鮮配置工作液。