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軟海綿酸(Okadaic acid,OA)是一種由甲藻類(如鰭藻屬和原甲藻屬)產(chǎn)生的腹瀉性貝類素(DSP toxins),可引起人類急性惡心、嘔吐、腹瀉和腹痛等癥狀。腹瀉性貝相關的有多種化學素,它們是親油性的聚醚類或大環(huán)內酯類化合物,已經(jīng)確認DSP的成分有3個組分:第1組酸性素-軟海綿酸(OA)及其衍生物鰭藻素(DTX1,DTX2,DTX3);第2組分為中性素-扇貝素(PTXs)組;第3組為其他素-蝦夷扇貝素(YTX)及其衍生物45-OHYTX,至今至少有12種成分,其中9種的結構已明確,與腹瀉有關的主要是第1組分。FDA制定的高水平為0.2ppm。歐盟建立了軟海綿酸(OA)160ug/kg(ng/g或者ppb)的水平。
腹瀉性貝類素ELISA試劑盒基于競爭性ELISA酶聯(lián)免疫的方法,腹瀉性貝類素的抗體包被于酶標孔內,樣品與腹瀉性貝類素-酶標記物加入到微孔內,若樣品中有腹瀉性貝類素殘留,它將與貝類素-酶標記物共同競爭酶標板包被的抗體。加入TMB底物后,顏色發(fā)生變化,經(jīng)酶標儀檢測讀數(shù)后確定樣品中腹瀉性貝類素的含量。顏色的深淺與素的殘留量成反比。
腹瀉性貝類素ELISA試劑盒有以下特點:一步法,即用設計,操作簡便;高靈敏度(0.1ng/g或者ppb),低檢測限(貝類肉樣10ng/g、水樣2ppb);高回收率(>80%);高重復性;快速(1小時內完成檢測)。
注意事項
1、標準品中含有腹瀉性貝類素,請小心使用。
2、不要使用過期的試劑盒。
3、不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
4、盡量保持室溫(25±2.5)°C,避免在通風口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的,不要在陽光直射下實驗,防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
5、水質量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水。
6、加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。
7、孵育時間的計算越規(guī)范越好,保持添加標準品的*性,先添加標準品后添加樣品。
8、從低濃度到高濃度地添加標準品,降低影響標準品曲線質量的風險。
9、將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存。
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