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嘔吐素的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum),主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動物在誤食被該素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的性效應(yīng)。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IgA腎病有關(guān)。DON屬于劇或中等物,人畜攝入了被DON污染的食物/飼料后,會導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中癥狀,嚴重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。研究表明,DON可能對免疫系統(tǒng)有影響,有明顯胚胎性和一定致畸作用,可能有遺傳性,但無致癌、致突變作用。谷物及飼料中DON的含量有嚴格的*。我國谷物中DON 的*為1.0 mg/kg 。因此,有必要對其進行有效的監(jiān)控。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐素的方法,但是其前處理步驟繁瑣,費用昂貴。嘔吐素ELISA檢測試劑盒則可經(jīng)濟、快速地檢測嘔吐素。
【注意事項】
1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復(fù)到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3. 每種試劑使用前均需搖勻。
4. 反應(yīng)終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。
5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6. 儲存條件:
試劑盒保存于2~8℃,不能冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感,因此要避光保存。
7. 試劑變質(zhì)的跡象:
顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應(yīng)當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8. 加入顯色液后,一般顯色時間為15~30min。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應(yīng)時間。
9. 嘔吐素ELISA檢測試劑盒反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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