檢測(cè)原理

孔雀石綠快速檢測(cè)試紙卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理，樣本中的孔雀石綠在流動(dòng)的過(guò)程中與膠 體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和 NC 膜檢測(cè)線（T 線）上的孔雀石綠—BSA 偶聯(lián)物 的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色的變化。

樣品收集和前處理

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，用紅色標(biāo)記筆進(jìn)行標(biāo)記，黑色標(biāo)記筆含有結(jié)晶紫，會(huì)對(duì)該實(shí)驗(yàn)造成污染魚(yú)、蝦樣本前處理方法：

（1）用均質(zhì)器均質(zhì)組織樣本；

（2）稱(chēng)取 1.00.05g  均質(zhì)物至 10ml 新聚苯乙烯離心管中，加入 1ml 去離子水，渦動(dòng) 2min，加入 100  l孔雀石綠提取劑 1，再加入 1 瓶孔雀石綠提取劑 2，渦動(dòng) 2min，3000g以上，室溫（20-25℃）離心5min； 

（3）取上清液 1ml 上清液至 10ml 新聚苯乙烯離心管中，加入 50μ l 孔雀石綠氧化劑,渦動(dòng) 15s，于 50～60℃水浴氮?dú)饣蚩諝饬飨麓蹈桑?/p>

（4）加入 0.3ml 樣品復(fù)溶液渦動(dòng)溶解 3min，取 100  l 用于分析。

操作步驟

（1）從原包裝中取出試劑桶，打開(kāi)后取出所需數(shù)目的微孔試劑和試紙卡，并做好標(biāo)記。請(qǐng)?jiān)?60min 內(nèi)盡快使用。所需微孔試劑取出后，請(qǐng)立即蓋好試劑桶蓋，防止受潮。

（2）用微量移液器吸取 100 l 待檢樣本溶液于微孔中，緩慢抽吸且充分與微孔中試劑混勻。

（3）室溫（20~25℃）孵育 3min 后，吸取混勻液約 100ul垂直滴于加樣孔（S 孔）中。

（4）液體流動(dòng)時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，反應(yīng) 5min，根據(jù)示意圖判定結(jié)果，其他時(shí)間判定無(wú)效。