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日本生研 假結(jié)核耶爾森氏菌鼠抗診斷血清(日本生研)
廣州健侖生物科技有限公司
(廣州健侖旗下全資子公司:廣州創(chuàng)侖生物制品有限公司)
廣州健侖生物有代理日本生研、丹麥SSI、德國Sifin、泰國血清:
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、乙肝、寨卡、黃熱病、黑熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
日本生研 假結(jié)核耶爾森氏菌鼠抗診斷血清(日本生研)
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一、材料準(zhǔn)備
1) 250 ml TB溶液
10mM Pipes or 10 mM Hepes,0.65g
15 mM CaCl2,0.55g
250 mM KCl,4.66g
55 mM MnCl2,2.47g
除MnCl2外,將其它成份溶解于ddH2O后,用0.1M HCl調(diào)節(jié)pH值至6.7(如果HCl加過量了,必須廢棄溶液后重新配制,不能用堿再調(diào)低pH值后使用),然后將2.475g MnCl2加入溶液,溶解后定容,用0.45 um孔徑的濾膜過濾除菌,分裝為每瓶50 ml,4°C貯存?zhèn)溆谩?br />2) 其它溶液
250 mM KCl溶液100 ml:將1.86 g KCl溶解到100 ml ddH2O。
1M MgCl2 +1 M MgSO4溶液10 ml:先配制1M MgCl2溶液,然后加入MgSO4,溶解后高壓滅菌。
50 ml of 1 M glucose with ddH2O, filter, aliquot in 1.5 ml, store at -20°C
100 ml SOB培養(yǎng)基:
蛋白胨(Bacto tryptone):2 g
酵母提取物(Bacto yeast extract):0.5 g
NaCl:0.05 g
上述成份溶解于ddH2O后,加入10 ml 250 mM的KCl溶液,用5N NaOH調(diào)節(jié)pH值至7.0 (~0.2 ml),用ddH2O定容至100 ml,高壓滅菌后待用。
使用前,在100 ml SOB培養(yǎng)基中加入1 ml 2M Mg2+ (終濃度為20mM)。
SOC培養(yǎng)基:
在SOB培養(yǎng)基中加入葡萄糖至終濃度為20 mM即為SOC培養(yǎng)基
3) 高壓滅菌的500 ml錐形瓶。
二、超級(jí)感受態(tài)制備方法:
1、將凍存的DH5α接種到2 ml SOB培養(yǎng)基,37°C振蕩培養(yǎng)。
2、取1 ml培養(yǎng)液接種到100 ml SOB,37°C培養(yǎng)2~2.5 h,細(xì)菌濃度約為4 ~7×107CFU/ml或OD600值為0.5。每20~30 min測(cè)定1次OD600值。
3、將培養(yǎng)液分裝到2個(gè)離心管,每管50 ml,冰浴10-15 min.
4、 750-1000 g (2000-3000 rpm),4°C離心12 min,*去除液體,收集菌體。