肺炎衣原體IgM檢測試劑盒 ELISA

肺炎衣原體IgM檢測試劑盒 ELISA

廣州創(chuàng)侖生物制品有限公司

   肺炎衣原體（TWAR組）感染后會引發(fā)上、下呼吸道炎癥，如咽炎、鼻竇炎、急性支氣管炎等。但多數(shù)人癥狀較輕或無癥狀，不加治療和延緩治療的病情會嚴(yán)重。肺炎衣原體感染者血清檢測陽性結(jié)果表明兒童含量較低，隨年齡逐漸增加。樣本的采集和患者適時的血清學(xué)檢驗會影響到檢驗結(jié)果。一般情況血清IgM在肺炎衣原體感染后2---4周出現(xiàn)，然后IgG和IgA在6----8周出現(xiàn)。IgM一般在2---6個月后*消失。IgG通常緩慢減少。IgM是早期診斷的依據(jù)。

實驗原理：
將肺炎衣原體包被于微孔板→加入血清,使得抗原抗體結(jié)合→37℃育溫1小時→洗去未結(jié)合的抗體→加入酶結(jié)合物→37℃育溫1小時→洗去酶結(jié)合物→加入底物→加入終止液450nm→讀取吸光值→結(jié)果計算

實驗流程：2×50ul陰性對照、1×50ul陽性對照和稀釋后的樣本加入到微孔板里→37C育溫1小時→洗液洗滌3次→加入50ulHRP酶結(jié)合物→37℃育溫1小時→洗液洗滌3次→加入100ulTMB底物→室溫平衡15分鐘→加入100ul終止液→450nm讀取吸光度→計算結(jié)果

試劑盒組成：
1、包被肺炎衣原體的微孔板      1×96
2、濃縮洗液（20倍稀釋）       100ml
3、樣本稀釋液（紅蓋）          60 ml
4、酶稀釋液（綠蓋）            40ml
5、陰性對照                    1.25ml
6、陽性對照                    0.75ml
7、酶結(jié)合物                    0.2ml
8、底物                        14ml
9、終止液                      15ml
10、封膜                       1張
11、說明書                     1份

所需其他材料：
1．干凈工作臺
2．用于稀釋酶結(jié)合物的塑料桶
3．移液器5-50ul、50-200ul和200-1000ul及吸頭若干
4．1L的容量瓶
5．50ul的量筒
6．洗瓶
7．吸光度值
8．振蕩器1個
9．37℃恒溫箱1個
10．酶標(biāo)儀1個
11．蒸餾水

注意事項：
本品僅供體外診斷使用。
1．本試劑盒生物學(xué)安全性遵照FDA/CE推薦方法檢測HBV/HCV/HIV1/HIV2均陰性。
2．底物對皮膚和粘膜有損害避免接觸。
3．在有效期內(nèi)使用本試劑盒，不同批次的試劑盒禁止交叉使用。
4．終止液對眼睛和皮膚有損傷，一旦濺入眼睛，用大量清水沖洗并遵循醫(yī)囑。
儲存條件：
1．試劑盒2～8℃保存，試驗完畢立即放入冰箱，禁止冰凍。
2．試劑盒一旦拆封，務(wù)必于90天內(nèi)用完。
3．洗液現(xiàn)配現(xiàn)用，如一次性配完，2～8℃保存21天。
4．標(biāo)本2～8℃可以保存7天，如需保存7天以上，則需-20℃保存。

操作步驟：
試劑準(zhǔn)備：
1．所有試劑使用前混勻并平衡至室溫。
2．洗液20倍稀釋：如50ul濃縮洗液加入950ml水。酶結(jié)合物1:300稀釋（如10ul加入300ul的稀釋液）。
3．血清樣本1:105稀釋，如加入5ul的血清，加520ul的樣本稀釋液，或者采用兩步法稀釋，加入10ul病人血清，加入200ul樣本稀釋液，取出該稀釋后的溶液25ul，再加入100ul的樣本稀釋液（陰性、陽性和標(biāo)準(zhǔn)品按以上比例稀釋）。
4．每孔加入50ul的稀釋后的液體（空白孔加入樣本稀釋液）。
5．封膜后，37℃育溫1小時，拍干液體。
6．用稀釋后的洗液每孔300-350ul洗滌3次。
7．拍干后加入酶結(jié)合物的稀釋液50ul。
8．封膜后，37℃育溫1小時，拍干液體。
9．重復(fù)第6步。
10．加入100ul底物，室溫放置15分鐘。
11．加入終止液100ul。
12．30分鐘內(nèi)檢測450/620nm檢測吸光度。

檢測的有效性：
檢測結(jié)果必須符合下列條件，否則重新測試。
1．陽性對照吸光度值必須≥0.8（450nm讀取吸光度）
2．陰性對照的平均值必須0.1＜NC≤0.4（450nm讀取吸光度）
結(jié)果計算：
樣本的吸光值（COV）和吸光指數(shù)(COI)的換算：
COV等于NC×2
NC=兩個陰性孔的吸光度的平均值。

   廣州創(chuàng)侖生物制品有限公司是集研制開發(fā)、銷售、服務(wù)于一體的企業(yè),公司產(chǎn)品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測試劑，du pin快速檢測，動物疾病防疫檢測試劑，免疫診斷試劑、臨床血液學(xué)和體液學(xué)檢驗試劑、微生物檢驗試劑、分子生物學(xué)檢驗試劑、臨床生化試劑、有機試劑等眾多領(lǐng)域，同時核心代理panbio、focus、qiagen、ibl、cortez、fuller、inbios、binaxnow、lumuquick、日本富士、日本生研等多家有名診斷產(chǎn)品集團公司產(chǎn)品，致力于為商檢單位、疾病預(yù)防控制中心、海關(guān)出入境檢疫局、衛(wèi)生防疫單位,緝毒系統(tǒng)，戒毒中心，檢驗檢疫單位、生化企業(yè)、科研院所、醫(yī)療機構(gòu)等機構(gòu)與行業(yè)提供高品質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù)。