貨號: | CM-6036G |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | DH5αChemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
BL21感受態(tài)細(xì)胞基因型:
E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
BL21感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
BL21是最早開發(fā)的用于原核表達(dá)的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達(dá)菌株均來源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達(dá),不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7啟動子驅(qū)動的蛋白表達(dá)(如:pET系列);但含有大腸桿菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如:pGEX,pMAL質(zhì)粒)。
High5TM系列 BL21感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)107cfu/μg。
BL21感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
- 取100μl冰上融化的BL21感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激90秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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