貨號(hào): | CM-6047G |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | XL1-BlueChemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品介紹:
Shuffle T7-K12菌株來(lái)源于大腸桿菌K12菌株,適用于T7啟動(dòng)子啟動(dòng)的蛋白表達(dá)。細(xì)胞內(nèi)組成型表達(dá)的二硫鍵異構(gòu)酶DsbC不僅有利于表達(dá)蛋白形成正確的二硫鍵,并具有分子伴侶的功能,幫助不含二硫鍵的蛋白正確折疊。T7 RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,組成型表達(dá)的lac 阻遏蛋白能降低基因的背景表達(dá),有利于毒性蛋白的表達(dá),沒(méi)有λ前噬菌體序列,具有抗T1噬菌體感染特點(diǎn)。Shuffle T7-K12感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于106 cfu/μg DNA。
Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞基因型: F′lac, pro, lacIQ / r (ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 r(phoA) PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) rtrxB rpsL150(StrR) rgor r (malF)3
菌株抗性:對(duì)氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素和四環(huán)素敏感,對(duì)鏈霉素和壯觀霉素抗性。
儲(chǔ)存條件:-70℃保存,避免反復(fù)凍融。
Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞?操作說(shuō)明:
- 取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
- 向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。