貨號: | CM-6043G |
供應(yīng)商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | XL1-BlueChemically Competent Cell |
保質(zhì)期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞基因型:
fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--TetS) endA1 (mcrCmrr)114::IS10
T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
T7 Express菌株為大腸桿菌BL21增強(qiáng)型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,主要適用于含有T7啟動子的原核表達(dá)載體(如pET等)的蛋白表達(dá),同樣適用于需要大腸桿菌RNA聚合酶來轉(zhuǎn)錄RNA的非T7啟動子的表達(dá)載體(如pGEX等)。該菌株區(qū)別于BL21(DE3)菌株的優(yōu)勢在于T7 RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,并具有抗T1噬菌體感染等特點。T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于108 cfu/μg DNA。
T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞操作說明:
- 取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞其他推薦:
菌株抗性:對氨芐青霉素,卡那霉素,壯觀霉素,氯霉素,鏈霉素和四環(huán)素敏感
T7表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞儲存條件:-70℃保存,避免反復(fù)凍融。