高靈敏ECL發(fā)光試劑 Western Chemiluminescent HRP Substrate

Cat No. KTSM1901

簡介：
本ECL試劑盒是基于魯米諾（luminol）的高靈敏底物體系，用于在免疫印跡實驗中檢測辣根過物氧化酶（HRP）。試劑盒中的增強劑使得本試劑盒能檢測fg至pg級抗原，背景干凈?？梢允褂肵光片或化學(xué)發(fā)光成像儀進行檢測。由于本產(chǎn)品靈敏度高，檢測豐度高的抗原，如actin等時，應(yīng)適當(dāng)降低一抗及二抗的濃度。

高靈敏ECL發(fā)光試劑運輸和保存條件：
室溫運輸。收到試劑后請避光，4度保存。室溫保存時，底物可以穩(wěn)定保存6個月；4度保存時，可以保存1年以上。

產(chǎn)品組成：
超敏ECL發(fā)光劑/增強劑，50ml
超敏ECL過氧化物/穩(wěn)定劑，50ml

高靈敏ECL發(fā)光試劑注意事項：
1. 為獲得結(jié)果，請優(yōu)化實驗條件，包括樣品，封閉試劑，洗滌液，一抗，二抗的選擇及孵育時間等。
2. 在轉(zhuǎn)膜，封閉，洗滌及一抗二抗孵育過程中防止膜干掉。
3. 為保證結(jié)果，請使用使用脫色搖床等設(shè)備，充分洗滌一抗二抗等。
4. 由于抑制HRP的活性，請盡量避免使用,尤其在二抗孵育時，不能加疊。
5. 與膜接觸時，請使用干凈的手套或鑷子，避免蛋白污染。
6. 底物盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。在室溫條件下，配制好的底物可以穩(wěn)定8小時。避免強光照射底物。短時間日光燈照射不影響配制好的底物的效果。

高靈敏ECL發(fā)光試劑使用方法（X光片）：
1. 根據(jù)樣品中抗原的濃度及一抗的效價，用一抗孵育印跡膜室溫2小時或4度過夜。
2. 充分洗滌后，二抗室溫孵育1小時。再充分洗滌后。
3. 按需要量將發(fā)光劑和過氧化物按1:1比例充分混勻得到發(fā)光物工作液。按1平方厘米印跡膜0.1ml工作液準備。
4. 棄去洗滌液，將工作液加到印跡膜上，孵育5分鐘。
5. 將印跡膜取出，并吸去多余的工作液。
6. 將印跡膜放置于兩層干凈的保鮮膜或塑料保護殼之間，去除其中的氣泡。
7. 將印跡膜吸附蛋白的面向上放置，置于X光片盒中，在暗室內(nèi)壓上X光片適當(dāng)?shù)臅r間。進行顯影和定影。

使用方法（化學(xué)發(fā)光成像儀）：
1. 第1-5步與X光片方法相同。
2. 將印跡膜放置于成像儀的合適位置。
3. 選擇信號累積模式采集信號。

常見問題，可能原因及解決方案