毓秀生物科技(上海)有限公司

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[供應]免疫組化操作實驗

貨物所在地:上海上海市

產(chǎn)地:上海

更新時間:2024-10-26 21:00:07

有效期:2024年10月26日 -- 2025年4月26日

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免疫組化是應用免疫學基本原理-抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(shù)(immunohistochemistry)

免疫組化操作實驗

1.石蠟切片脫蠟至水。

2.3%H 2 O2 室溫孵育 5-10 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。

3.蒸餾水沖洗, PBS 浸泡 5 分鐘 x2 (如需抗原修復,可在此步后進行)。

4.5-10% 正常山羊血清(PBS 稀釋)封閉,室溫孵育 10 分鐘,傾去血清,勿洗。滴加 一抗 工作液, 37 ℃ 孵育 1-2 小時或 4 ℃ 過夜。

5.PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

6.滴加適量 生物素標記二抗 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。

7.PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

8.滴加適量的 辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。

9. PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

10.顯色劑顯色 3-15 分鐘(DAB 或 NBT/BCIP)

11.自來水充分沖洗,蘇木素復染,脫水,透明,封片。

免疫組化操作實驗 結(jié)果判定:

陽性組織為棕色(DAB顯色)或是紫紅色(NBT/BCIP)著色

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