八臂迷宮實驗方法-僅供參考

八臂迷宮（放射臂迷宮（radial arm maze））實驗也是常用的評價動物學(xué)習(xí)記憶能力的模型之一，由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據(jù)是，控制進食的動物受食物的驅(qū)使對迷宮各臂進行探究；經(jīng)過一定時間的訓(xùn)練，動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測定動物的工作記憶（working memory）和參考記憶（reference memory）。所用動物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對腦區(qū)毀損和多種藥物均很敏感。

（一） 實驗設(shè)備  實驗多數(shù)采用八臂放射迷宮，也有采用 十二臂或者二十四臂迷宮。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的八臂迷宮。每個臂長41.9cm，寬11.4cm，高10.1cm；其上有一透明蓋，兩側(cè)各有兩個相對的光電管。迷宮中央八角形區(qū)的直徑為27.4cm；上有一透明頂蓋。中央?yún)^(qū)通往各臂的入口處有一活動門，用來對動物的出入臂進行控制。迷宮與計算機相聯(lián)。也可用攝像跟蹤系統(tǒng)（video tracking system）取代光電管來記錄動物在迷宮內(nèi)的活動行為。放置迷宮的房間內(nèi)有一些外部暗示（extramaze cues）。動物在迷宮內(nèi)可以看見這些暗示，并借此進行空間定位。實驗用大鼠或小鼠進行。

（二）實驗方法

1．動物適應(yīng)實驗環(huán)境1周后，稱重，禁食24小時。此后每天訓(xùn)練結(jié)束后限制性地給予正常食料（據(jù)體重不同，大鼠16-20g，小鼠2-3g），以使體重保持在正常進食大鼠的80%~85%。

2．第二天，迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒（每只4~5粒，直徑約3~4mm）。然后，同時將4只動物置于迷宮中央（通往各臂的門打開）。讓其自由攝食、探究10min。

3．第三天，重復(fù)第二天的訓(xùn)練。這一過程讓動物在沒有很強的應(yīng)激條件下熟悉迷宮環(huán)境。

4．第四天起，動物單個進行訓(xùn)練：在每個臂靠近外端食盒處各放一顆食粒，讓動物自由攝食。食粒吃完或10min后將動物取出。

5．第五天，將食物放在食盒內(nèi)，重復(fù)前一天的訓(xùn)練，一天2次。

6．第六天以后，隨機選4個臂，每個臂放一顆食粒；各臂門關(guān)閉，將動物放在迷宮中央；30s后，臂門打開，讓動物在迷宮中自由活動并攝取食粒，直到動物吃完所有4個臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完，則實驗終止。每天訓(xùn)練兩次，其間間隔1h以上。

記錄以下幾個指標(biāo)：

○1工作記憶錯誤（working memory errors）次數(shù),即在同一次訓(xùn)練中動物進入食物臂的總次數(shù)-1次；

○2參考記憶錯誤（reference memory errors ）次數(shù)，即動物進入不曾放過食粒的臂的總次數(shù)；

○3總的入臂次數(shù)；

○4成功進入潛伏期，即動物di一次進入食物臂的時間；

○5錯入潛伏期，即動物di一次進入未放食物的臂的時間；

此外，計算機還可記錄動物在放射臂內(nèi)及中央?yún)^(qū)的活動情況，包括運動距離和運動時間等。

連續(xù)5次訓(xùn)練的工作記憶錯誤為零、參考記憶錯誤不超過1次時，可以開始藥物測試或腦內(nèi)核團結(jié)構(gòu)毀損實驗。一般先給溶劑（如生理鹽水），再給削弱記憶的藥物（如東~~~~MK-801等），然后加用增強記憶的藥物，劑量由低到高。

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