總黃酮含量測(cè)試試劑盒分光光度計(jì)法測(cè)定原理及應(yīng)用

總黃酮含量測(cè)試試劑盒(C002-96T 分光光度計(jì)法)

一.測(cè)定原理

黃酮中處于相鄰位的羰基、羥基可以共同絡(luò)合金屬而顯色。在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在條件下，黃酮類(lèi)化合物與鋁鹽生成螯和物，加入堿溶液后顯紅橙色，在510nm處有大吸收峰。蘆丁是*的黃酮類(lèi)化合物，常被用作標(biāo)準(zhǔn)品。

二.試劑組成

試劑一：無(wú)色液體50mL ×1瓶

試劑二：無(wú)色液體50mL ×1瓶

試劑三：顯色液200mL ×1瓶

試劑四：1.0mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL×1瓶

三.儲(chǔ)存條件及有效期

試劑一、試劑二4℃保存，試劑三-20℃保存，可保存3個(gè)月。

四.試劑的配制

試劑四應(yīng)用液：

取2mL試劑四，加入18mL雙蒸水，稀釋至20mL，得到100μg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液，分別采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL試劑四于空試管中，加入4.0，3.0，2.0，1.0，0mL雙蒸水，得到20，40，60，80，100 μg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。

五.操作步驟

充分混勻，室溫靜置6min。

充分混勻，室溫靜置6min。

 充分混勻，室溫靜置15min，以試劑空白調(diào)零，分光光度計(jì)510nm處測(cè)吸光值。

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