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初級(jí)會(huì)員 | 第7年

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R-SHM芯片除酶除熱原流程

時(shí)間:2023/2/13閱讀:317
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脂質(zhì)納米粒LNPs作為mRNA遞送的首先載體。LNPs主要通過陽(yáng)離子的磷脂材料與其他輔助磷脂完成顆粒的構(gòu)建,通過RNA所帶的負(fù)電與陽(yáng)離子磷脂的正電相互吸附,可實(shí)現(xiàn)較高的包載效果,并且在體內(nèi)由低密度脂蛋白介導(dǎo)的胞吞機(jī)制可使納米粒子成功被細(xì)胞攝取,實(shí)現(xiàn)良好的細(xì)胞攝取效果。

R-SHM處方工藝篩選芯片盒,使用次數(shù)根據(jù)不同的測(cè)試條件可以>30次*或>100次**。

備注:

*采用處方BNT空白LNP處方測(cè)試,測(cè)試條件為1:3,總流速12ml/min,總體積為10ml,粒徑和PDI能保持一致。


**采用純乙醇測(cè)試,測(cè)試條件為1:1,總流速20ml/min,總體積為10ml,芯片無(wú)泄露。采用BNT處方,粒徑和PDI能與新芯片保持一致。

流速范圍:1ml/min-20ml/min。



R-SHM芯片除酶除熱原流程


試劑

?

75%乙醇,

0.5MNaOH 溶液,

無(wú)水乙醇, 

DEPC 水


?

1、芯片使用前清洗

?

01

75%乙醇清洗

?

用 2 支 2.5ml 注射器各取 2ml 75%乙醇,

調(diào)用“清洗程序"的方法

(兩相比例=1:1,總體積 4ml,流速 12ml/min)

取 15ml 離心管掛上機(jī)器左邊的收集管卡槽

點(diǎn)擊軟件運(yùn)行。

02

0.5MNaOH 溶液清洗

?

用 2 支 2.5ml 注射器,

各取 0.5MNaOH 溶液,

重復(fù)上述操作條件清洗。

清洗后靜置 1小時(shí)。

03

殘余液體排空

?

用 2 支 2.5ml 注射器,

抽滿空氣,

插入芯片,

重復(fù)上述操作條件排空。

04

無(wú)水乙醇—DEPC水

?

用 2 支 5ml 注射器,

各取無(wú)水乙醇,DEPC 水 5ml,

軟件設(shè)置

(兩相比例=1:1,總體積10ml,流速 12ml/min),

具體操作如上,重復(fù)清洗 3 次,

排空殘余液體。

                  清洗步驟:

?

無(wú)水乙醇-DEPC 水清洗→

75%乙醇清洗→

0.5MNaOH 溶液清洗→

殘余液體排空→

無(wú)水乙醇-DEPC 水清洗3次→

殘余液體排空 


注意:溶液的抽取體積應(yīng)大于軟件設(shè)置體積。


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