醛縮酶的特性及測(cè)定方法

醛縮酶是裂解酶的一種，狹義的指催化裂解1.6-二磷酸-D-果糖生成3-磷酸-D-甘油醛與α-二羥丙酮磷酸反應(yīng)的酶（同時(shí)在糖異生中也可催化這個(gè)反應(yīng)的逆反應(yīng)），即指1.6-二磷酸-D-果糖醛縮酶（Ec 4.1.2.13）。（廣義的指催化同形式反應(yīng)的酶，例如亦有將鼠李糖磷酸醛縮酶等統(tǒng)稱(chēng)為醛縮酶）。

一、概況
1、反應(yīng)式
測(cè)定溫度為30℃，最適pH為7.0。
2.米氏常數(shù)
3.專(zhuān)一性
酵母醛縮酶對(duì)果糖-1,6-二磷酸具有高度的專(zhuān)一性，但是，此酶與L-山梨糖-1,6-二磷酸反應(yīng)速度僅為果糖-1,6-二磷酸反應(yīng)速度的30%。
4.抑制劑
醛縮酶的抑制劑有 Cu2+，Zn2+，Ag+和鄰-苯菲繞啉。
5.純度要求
所需純度最(空白)低限度為9單位/毫克，所含的D-甘油醛-3-磷酸脫氫酶與L-甘油-3-磷酸脫氫酶應(yīng)分別小于0.01%與0.05%。
6.意義
醛縮酶可用來(lái)測(cè)定果糖-1,6-二磷酸。血清中醛縮酶對(duì)于肌病是一項(xiàng)關(guān)鍵性的診斷試驗(yàn)，并且對(duì)于心肌梗塞、肝病和急性精神病等病也有用處。
7.穩(wěn)定性
此酶以3.2MpH7.6的硫酸銨懸浮液保存在4℃下，其穩(wěn)定期可達(dá)6個(gè)月之久。pH 值小于4.5，則使此酶發(fā)生不可逆變性。
二、測(cè)定方法
1.反應(yīng)式
經(jīng)Jagannathan等改進(jìn)的反應(yīng)式：
可在240nm處跟蹤吸光率的增量。一個(gè)單位即定為在規(guī)定的條件下溫度為25℃，每分鐘能使吸光率增量變化為1.00時(shí)所需的活性。
2.偶聯(lián)法
按反應(yīng)式(5)在340nm處測(cè)量吸光率的減量,并由此可計(jì)算出酶活性?；钚?以毫單位/毫升醛縮酶表示)即等于吸光率差值ΔA(10分鐘)x129(于37℃)。