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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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新款光度計(jì)使用方法簡單原理

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新款光度計(jì)使用方法簡單原理

 

這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)，產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其大的點(diǎn)是，敏感度好，是Lowry 和BCA 兩種測(cè)試方法的2 倍；操作更簡單，速度更快；只需要種反應(yīng)試劑；化合物可以穩(wěn)定1小時(shí)，方便結(jié)果;而且與系列干擾Lowry，BCA 反應(yīng)的還原劑(如DTT，巰基乙醇)相容。但是對(duì)于去污劑依然是敏感的。

 

　　使用方法

 

　　1.接通電源，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘。

 

　　2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至"1"檔(若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到"0"檔時(shí)，需選用較檔。)

 

　　3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動(dòng)波長選擇鈕。

 

　　4.將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使空白管對(duì)準(zhǔn)光路。

 

　　5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤針向t=0處。

 

　　6.蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)"100"調(diào)節(jié)器，使空白管的t=100，針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測(cè)定管的光密度值，并記錄。

 

　　7.比色畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

 

　　簡單原理

 

　　分光光度計(jì)采用個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生定波長的光源，光源透過測(cè)試的樣品后，分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

 

　　注意事項(xiàng)

 

　　1.該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

 

　　2.使用本儀器前，使用者應(yīng)該了解本儀器的結(jié)構(gòu)和作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之能。在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安性能行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。

 

　　3.在儀器尚未接通電源時(shí)，電表針須于"0"刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲行調(diào)節(jié)。


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