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 Kalenbiomed研究報(bào)告

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Kalenbiomed Kalenbiomed研究報(bào)告

低密度脂蛋白受體缺乏導(dǎo)致小鼠破骨細(xì)胞生成受損和骨量增加，因?yàn)槠乒羌?xì)胞缺陷-細(xì)胞融合骨質(zhì)疏松癥與高脂血癥引起的動(dòng)脈粥樣硬化和血管鈣化有關(guān)。然而，解釋這些疾病平行進(jìn)展的細(xì)胞和分子機(jī)制尚不清楚。在這里，我們使用低密度脂蛋白受體基因敲除(LDLR-/-)小鼠來(lái)闡明 LDLR 在調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化中的作用，破骨細(xì)胞負(fù)責(zé)骨吸收。在含有低密度脂蛋白耗盡的血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)野生型破骨細(xì)胞前體降低了 NF-κB 配體(RANKL)誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成的受體激活劑，并且通過(guò)用天然和氧化的 LDL 同時(shí)處理另外拯救了這種缺陷。破骨細(xì)胞前體以不依賴(lài) RANKL 的方式組成性表達(dá) LDLR。來(lái)自 LDLR-/-破骨細(xì)胞前體的破骨細(xì)胞形成被延遲，并且在培養(yǎng)物中形成的多核細(xì)胞比野生型細(xì)胞更小并且含有更少的細(xì)胞核，意味著細(xì)胞-細(xì)胞融合受損。盡管有這些發(fā)現(xiàn)，在 LDLR-/-破骨細(xì)胞中，RANK 信號(hào)傳導(dǎo)(包括 Erk 和 Akt 的激活)是正常的，并且在 LDLR 無(wú)效和野生型細(xì)胞中，RANKL 誘導(dǎo)的 NFATc1(破骨細(xì)胞生成的主要調(diào)節(jié)劑) ，組織蛋白酶 K 和酒石酸鹽抗性酸性磷酸酶的表達(dá)是相當(dāng)?shù)?。相比之下，與野生型相比，LDLR-/-質(zhì)膜中破骨細(xì)胞融合相關(guān)蛋白 v-ATP 酶 v0亞基 d2和樹(shù)突狀細(xì)胞特異性跨膜蛋白的量減少，表明與發(fā)生在質(zhì)膜上的細(xì)胞-細(xì)胞融合受損相關(guān)。LDLR-/-小鼠在體內(nèi)始終表現(xiàn)出增加的骨量。這種變化伴隨著骨吸收參數(shù)的降低，而骨形成參數(shù)沒(méi)有變化。這些發(fā)現(xiàn)為破骨細(xì)胞的分化提供了一種新的機(jī)制，并提高了對(duì)破骨細(xì)胞形成與血脂之間相關(guān)性的理解。岡康康，M. ，中八，M. ，林田，c，伊藤，j，金田，t，增原，M. ... 和博田，Y。(2012)。由于破骨細(xì)胞-細(xì)胞融合缺陷，低密度脂蛋白受體缺乏導(dǎo)致小鼠破骨細(xì)胞生成受損和骨量增加。生物化學(xué)雜志，287(23) ，19229-19241。

缺乏抗氧化活性的有效抗氧化樹(shù)狀大分子，抗氧化劑對(duì)氧化應(yīng)激有保護(hù)作用。不幸的是，在過(guò)渡金屬存在的情況下，抗氧化劑，包括具有強(qiáng)大抗氧化活性的多酚，也可能表現(xiàn)出促氧化作用，這可能不可逆地?fù)p害 DNA。因此，抗氧化劑具有較強(qiáng)的自由基清除能力，缺乏親氧化作用，具有重要的生物學(xué)意義。我們報(bào)道了兩個(gè)抗氧化樹(shù)形大分子，它們的表面富含多個(gè)酚羥基、芐基氫和電子給予環(huán)取代基，這些取代基有助于它們強(qiáng)有力的自由基淬滅特性。為了最大限度地減少其促氧化作用，樹(shù)狀大分子設(shè)計(jì)了金屬螯合三(2-氨基乙基)胺(TREN)核心。樹(shù)突狀抗氧化劑是通過(guò)還原胺化反應(yīng)將6個(gè)紫丁香醛或分子附著在 TREN 上制備的。根據(jù)1,1-二苯基 -2-苦基肼的測(cè)定，它們表現(xiàn)出強(qiáng)大的自由基清除能力: 比槲皮素強(qiáng)5倍，比 Trolox 強(qiáng)15倍?？寡趸瘶?shù)狀大分子還保護(hù)低密度脂蛋白和 DNA 免受2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)鹽酸鹽引起的自由基損傷。更重要的是，與槲皮素和 Trolox 不同，這兩種 TREN 抗氧化樹(shù)狀大分子在與生理量的銅離子孵育時(shí)不會(huì)通過(guò)其促氧化作用損傷 DNA。樹(shù)狀大分子對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞也無(wú)毒性作用。李，夏爾馬，a，Uzarski，R.L. ，昌，j. e，徐，h，赫爾德，r. a，... & 納爾遜，j. l (2011)。缺乏親氧化活性的有效抗氧化樹(shù)狀大分子。自由基生物學(xué)與醫(yī)學(xué)，50(8) ，918-925。氧化低密度脂蛋白是 C型肝炎感染中干擾素反應(yīng)性的一個(gè)新的預(yù)測(cè)因子干擾素反應(yīng)性與低密度脂蛋白中血清低密度脂蛋白(LDL)之間無(wú)法解釋的關(guān)聯(lián)可能是由于氧化低密度脂蛋白，一種通過(guò)擾亂 C型肝炎與其主要受體之間的相互作用而阻斷病毒細(xì)胞進(jìn)入的丙型肝炎病毒。索爾巴赫，p。 ，韋斯特豪斯，s。 ，Deest，m。 ，赫爾曼，e。 ，伯格，t。 ，曼斯，m。 ，... & von Hahn，t。(2015)。氧化低密度脂蛋白是一種預(yù)測(cè)慢性 C型肝炎干擾素反應(yīng)性的新方法。細(xì)胞與分子胃腸學(xué)與肝病學(xué)，1(3) ，285-294。

細(xì)胞內(nèi)在的溶酶體脂解作用對(duì)巨噬細(xì)胞替代激活至關(guān)重要通過(guò)白細(xì)胞介素6受體 α (IL-4Rα)驅(qū)動(dòng)的替代(M2)巨噬細(xì)胞激活對(duì)寄生蟲(chóng)免疫、傷口愈合、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化和代謝穩(wěn)態(tài)是重要的。M2極化依賴(lài)于脂肪酸氧化(FAO) ，但支持這一代謝過(guò)程的脂肪酸來(lái)源尚不清楚。我們發(fā)現(xiàn)，通過(guò) CD36攝取三酰甘油底物及其隨后通過(guò)溶酶體酸性脂肪酶(LAL)進(jìn)行的脂肪分解對(duì)于氧化磷酸化升高(OXPHOS) ，增強(qiáng)備用呼吸能力(SRC) ，延長(zhǎng)存活和共同定義 M2活化的基因的表達(dá)是重要的。脂肪分解的抑制在寄生蠕蟲(chóng)感染期間抑制了 M2的活化，并阻斷了對(duì)這種病原體的保護(hù)性反應(yīng)。我們的研究結(jié)果描繪了細(xì)胞固有的溶酶體脂解在 M2激活中的關(guān)鍵作用。阿布姆拉德，N.A. ，Artyomov，M.N. ，Pearce，E.J. ，Lam，WY. ，Everts，B. ，Yan，C. ，... & O’Sullivan，D. (2014)。細(xì)胞固有的溶酶體脂解作用是巨噬細(xì)胞選擇性激活的必要條件。電子給予基團(tuán)對(duì)多酚類(lèi)抗氧化樹(shù)狀大分子的影響許多研究報(bào)道了抗氧化劑在人類(lèi)疾病中的有益作用。在它們的生物學(xué)效應(yīng)中，大多數(shù)抗氧化劑清除體內(nèi)的反應(yīng)性自由基，從而減少與許多疾病發(fā)病機(jī)制有關(guān)的氧化應(yīng)激。抗氧化樹(shù)狀大分子是近年來(lái)報(bào)道的一類(lèi)新型高效抗氧化化合物。本研究合成了6個(gè)具有或不具有電子給予基團(tuán)(甲氧基)的多酚基抗氧化樹(shù)狀大分子，以闡明電子給予基團(tuán)(EDG)對(duì)其抗氧化活性的影響。丁香醛(2個(gè)正甲氧基)、草醛(1個(gè)正甲氧基)和4-羥基(0個(gè)甲氧基)與炔丙胺衍生，形成樹(shù)枝狀大分子。和甲基 α-d- 吡喃葡萄糖苷為原料，在自制的間隔單元上合成了聚醚核。為了制備第一代抗氧樹(shù)形大分子，利用微波能量和顆粒狀金屬銅催化劑，通過(guò)炔疊氮化合物1,3-環(huán)加成反應(yīng)將核心和構(gòu)件連接在一起。這些反應(yīng)條件導(dǎo)致高產(chǎn)率的目標(biāo)樹(shù)狀大分子，無(wú)銅污染?；?span> DPPH 抗氧化試驗(yàn)，用紫丁香醛和香蘭素修飾的抗氧化樹(shù)枝狀大分子的抗氧化活性分別是紫丁香醛和香蘭素的70倍和170倍以上。隨著 EDG 基團(tuán)數(shù)量的增加，樹(shù)枝狀大分子的抗氧化活性增強(qiáng)。當(dāng)樹(shù)狀大分子用于保護(hù) DNA 和人低密度脂蛋白(LDL)免受有機(jī)碳和氮基自由基的影響時(shí)，也得到了類(lèi)似的結(jié)果。此外，抗氧化樹(shù)狀大分子在生理量的銅存在下對(duì) DNA 沒(méi)有表現(xiàn)出任何促氧化活性。雖然這些樹(shù)狀大分子對(duì)碳和氮自由基具有很強(qiáng)的抗氧化活性，但 EPR 和 DNA 保護(hù)研究表明這些樹(shù)狀大分子對(duì)羥自由基缺乏有效性。樹(shù)枝狀大分子對(duì) CHO-K1細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒作用。李，Nanah，Maraskine，... & 夏爾馬，a (2015)。電子給予基團(tuán)對(duì)多酚基抗氧樹(shù)形大分子的影響。生物化學(xué)，111,125-134。 

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