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Biocare說明書-試驗方法
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CD19(RM)【RM332】Biocare說明書-試驗方法
儲存和穩(wěn)定性:
在2oC至8oC的溫度下儲存。該產(chǎn)品在打印的有效期內是穩(wěn)定的
小瓶標簽,當在這些條件下儲存時。過期后請勿使用
日期必須在定條件以外的任何條件下儲存
已證實的應及時使用稀釋的試劑;存儲剩余的
試劑溫度為2oC至8oC。用戶稀釋試劑的穩(wěn)定性尚未
由Biocare建立。
陽性和陰性對照應與所有患者同時進行
標本。如果觀察到無法解釋的意外染色
實驗室程序的變化和抗體的問題是
如有疑問,請致電或通過
biocare上提供的技術支持信息。
試樣制備:
固定在福爾馬林中的組織適合在石蠟包埋之前使用。
骨組織應在組織加工前脫鈣,以促進
組織切割,防止切片機刀片損壞。1,2
正確固定和嵌入表達特定抗原靶標的組織
應存放在陰涼處。《臨床實驗室改進法案》
CD19(RM)【RM332】
濃縮預稀釋兔單克隆抗體
901-3270-060223
TP v1(2021年10月15日)
(CLIA)在《美國聯(lián)邦法規(guī)匯編》第42卷第493.1259(b)節(jié)中要求“實驗室必須
自檢查之日起至少保留十年的染色玻片,以及
自檢查之日起至少保留兩年的試塊。"3.
染色前的組織處理:
按照推薦方案進行熱誘導表位檢索(HIER)
在下面在IHC之前,HIER的常規(guī)使用已被證明可以最大限度地減少
不一致性和標準化染色。4, 5
警告和注意事項:
1.該抗體含有少于0.1%的疊氮鈉。濃度較少
根據(jù)《美國聯(lián)邦法規(guī)匯編》第29卷,超過0.1%為不可報告的危險品
1910.1200,OSHA危險通信和EC指令91/155/EC。
用作防腐劑的疊氮鈉(NaN3)如果攝入會有毒。疊氮鈉
可能與鉛和銅管道發(fā)生反應,形成高爆炸性金屬
疊氮化物。處理后,用大量水沖洗以防止疊氮化物
管道中的積聚。(疾病控制中心,1976年,美國國家衛(wèi)生研究所
職業(yè)安全與健康,1976)6
2.固定前后的樣本,以及暴露在其中的所有材料
應該像能夠傳播感染一樣處理,并用
適當?shù)念A防措施。切勿用嘴移取試劑,避免接觸
皮膚和粘膜與試劑和標本。如果試劑
或標本接觸到敏感區(qū)域,用大量清水沖洗
水量。7
3.試劑的微生物污染可能導致
非特異性染色。
4.規(guī)定以外的培養(yǎng)時間或溫度可能會
錯誤的結果。用戶必須驗證任何此類更改。
5.超過小瓶上打印的有效期后,請勿使用試劑。
6.稀釋前的抗體試劑被最佳稀釋以供使用。進一步稀釋
可能導致抗原染色的損失。
7.濃縮抗體試劑的稀釋度必須在使用前進行驗證。
未特別推薦使用的任何稀釋劑也必須經(jīng)過驗證
兼容性和穩(wěn)定性。
8.SDS可應要求提供.
使用說明:
CD19(RM)的推薦染色方案[RM332]:
IntelliPATH FLX和手動使用:
用于intelliPATH FLX和手動使用的API3270,已被
采用MACH 4檢測系統(tǒng)進行標準化。使用TBS
洗滌步驟。
過氧化物
阻斷:用過氧化1阻斷5分鐘。
預處理:
使用Diva進行熱量回收
Declaker。參考Diva Decloker
具體說明的數(shù)據(jù)表。
蛋白質塊
可選擇的
在RT下培養(yǎng)5-10分鐘
背景懲罰者。
主要的,重要的
抗體:RT培養(yǎng)30分鐘。
查
探頭:不適用
在RT下用
二次聚合物。
聚合物:室溫下培養(yǎng)30分鐘
具有叔聚合物。
色原:
在RT下培養(yǎng)5分鐘
Biocare的DAB–OR–在
RT搭配Warp Red。
會簽:
蘇木精沉印。用沖洗
去離子水。應用Tacha的腮紅
溶液1分鐘。用去離子水沖洗
水
ONCORE Pro自動幻燈片染色系統(tǒng):
OPAI3270適用于ONCORE Pro。提到
有關具體使用說明,請參閱用戶手冊。協(xié)議
協(xié)議編輯器中的參數(shù)應編程為
跟隨:
方案名稱:CD19 Rb
協(xié)議模板
【說明】:Rb-HRP模板1
脫蠟(DS緩沖液
選項):DS2-50
抗原回收(AR
可選):AR1,高pH;101?C
塊選項:緩沖區(qū)
試劑名稱、時間、,
溫度:CD19 Rb,30分鐘,25°C
Ventana BenchMark ULTRA:
AVI3270適用于BenchMark ULTRA。參考
有關具體使用說明,請參閱用戶手冊。
建議的協(xié)議參數(shù)如下:
模板/檢測:OptiView DAB IHC
預處理方案:CC1 32分鐘
過氧化物酶:初級前過氧化物酶
抑制劑
初級抗體:16分鐘,36°C
Q系列-對于徠卡BOND-III:
ALI3270適用于徠卡BOND-III。參考
有關具體使用說明,請參閱用戶手冊。
建議的協(xié)議參數(shù)如下:
染色原染色
選項DAB
協(xié)議名稱:IHC協(xié)議F
檢測:粘合聚合物精制
HIER:20分鐘,ER2
過氧化物塊:5分鐘
標記(主要
抗體):15分鐘
小學后:8分鐘
聚合物:8分鐘
混合色原
精煉:10分鐘
蘇木精:5分鐘
質量控制
參考CLSI的設計和實施質量標準
免疫組織化學分析;批準的指南第二版(I/LA28-
A2)CLSI Wayne,PA USA。20118
陽性組織對照:扁桃體
外部陽性對照材料應為新鮮標本固定,
以與相同的方式盡快處理和嵌入
患者樣本。陽性組織對照表明制備正確
組織和適當?shù)娜旧夹g。一個陽性外部組織對照
對于每組測試條件,應包括在每次染色運行中。
應選擇用于外部陽性對照材料的組織
來自具有良好特征的低水平陽性的患者樣本
產(chǎn)生弱陽性染色的靶活性。的低陽性率
外部陽性對照的設計是為了確保檢測到細微的
不穩(wěn)定或問題引起的一級抗體敏感性變化
IHC方法。市售組織對照載玻片或
與患者樣本不同處理的樣本驗證試劑
僅性能,不驗證組織準備
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