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技術(shù)文章

cytoskeleton-BlastR™過濾系統(tǒng) 介紹

閱讀:422          發(fā)布時(shí)間:2024-5-29

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BlastR™過濾系統(tǒng)

概述

BlastR™裂解過濾系統(tǒng)允許用戶使用變性緩沖液從所有細(xì)胞隔室中捕獲蛋白質(zhì),以獲得相對于標(biāo)準(zhǔn)非變性緩沖液更完整的蛋白質(zhì)圖譜。變性緩沖液的一個(gè)顯著缺點(diǎn)是粘性基因組DNA污染,這可能干擾蛋白質(zhì)分析、蛋白質(zhì)在SDS-PAGE凝膠上的遷移以及干擾免疫沉淀測定。

BlastR™過濾器從變性細(xì)胞裂解緩沖液提取物中去除粘性基因組DNA,同時(shí)將處理時(shí)間縮短至不到一分鐘。專有過濾技術(shù)基于可壓縮聚氨酯過濾器,具有捕獲基因組DNA的最佳孔徑。過濾器的可壓縮性質(zhì)允許樣品的最大回收率,通常為原始體積的90%。

有兩種版本可供選擇:1)過濾器加緩沖液版本(Cat.#BLR01,包括;BlastR™裂解緩沖液),開發(fā)為

BlastR快速過濾套件

BlastR快速過濾套件(50個(gè)過濾器)

SKU BLR02

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

BlastR™過濾器與變性緩沖液(如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液)結(jié)合使用時(shí),可以快速可靠地制備無基因組DNAgDNA)的細(xì)胞裂解物,用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題,變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用,如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同,BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染,同時(shí)對裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

產(chǎn)品用途包括

降低樣品粘度

蛋白質(zhì)提取物的快速分離

變性裂解緩沖液提取物的制備

驗(yàn)證數(shù)據(jù):Blaster快速過濾套件白書

BlastR過濾器設(shè)置50個(gè)單元。

BlastR™裂解物gDNA的澄清

A) 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

B) 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%。

Signal Seeker™泛素檢測試劑盒(30份)

信號導(dǎo)引頭泛素化檢測試劑盒(30個(gè)測定,免疫沉淀格式)

SKU BK161

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

Signal Seeker™生產(chǎn)線的開發(fā)允許專家和非專家對關(guān)鍵的調(diào)節(jié)蛋白修飾進(jìn)行簡單分析。全面的Signal Seeker™試劑盒提供了一個(gè)親和珠系統(tǒng),用于從任何給定的細(xì)胞或組織裂解物中分離和富集修飾蛋白。然后使用靶蛋白的一級抗體通過標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。

產(chǎn)品用途包括

調(diào)查瞬態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制

測量多途徑成員蛋白的信號事件

發(fā)現(xiàn)感興趣的蛋白質(zhì)的新修飾

深入了解監(jiān)管機(jī)制

測量內(nèi)源性或瞬時(shí)表達(dá)的蛋白質(zhì)信號事件

驗(yàn)證數(shù)據(jù):泛素檢測試劑盒白書

試劑盒內(nèi)容

泛素試劑盒包含以下成分:

裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)澄清步驟洗滌步驟洗脫步驟西方步驟

BlastR™裂解緩沖液

BlastR™稀釋緩沖液

BlastR™過濾器

蛋白酶抑制劑雞尾酒

去泛素酶抑制劑Cocktail

Precision Red™蛋白質(zhì)測定試劑

泛素親和珠

泛素控制珠

BlastR™沖洗緩沖液

旋轉(zhuǎn)柱

珠子洗脫緩沖液

化學(xué)發(fā)光試劑A

化學(xué)發(fā)光試劑B

抗泛素HRP抗體

示例結(jié)果

這些試劑盒有許多應(yīng)用(見下一節(jié)),我們在這里描述Rac1蛋白的一個(gè)有趣應(yīng)用:

應(yīng)用1:調(diào)查高度瞬態(tài)調(diào)節(jié)事件

Rho蛋白家族的活性,包括Rac1,已知在一定程度上通過泛素化(也稱為泛素化)事件來調(diào)節(jié),泛素化事件可以導(dǎo)致

在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實(shí)驗(yàn)包括:

參與Rac1單泛素化和多泛素化的泛素酶或去泛素酶的藥理學(xué)研究

研究在各種不同生長因子或藥物治療下Rac1激活和泛素化之間的關(guān)系。

檢查泛素化Rac1與效應(yīng)物的相互作用。

檢查泛素化Rac1Rac1的其他調(diào)節(jié)性PTM之間的串?dāng)_。

欲了解更多信息,請聯(lián)系

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品:

Signal Seeker™磷酸酪酸檢測試劑盒(目錄號BK160

Signal Seeker™SUMOylation 2/3檢測套件(類別號BK162

Signal Seeker™BlastR™快速裂解物制備試劑盒(目錄號BLR01

Signal Seeker™泛素親和珠(類別號UBA01B珠)

Signal Seeker™PTMtrue™泛素抗體(目錄號AUB01

BlastR快速裂解物制備試劑盒

BlastR快速裂解物制備試劑盒(50個(gè)過濾器)

SKU BLR01

數(shù)據(jù)表

MSDS

數(shù)量/包裝

BlastR™過濾器與變性緩沖液(如胍、尿素或通常產(chǎn)生豐富粘度的高SDS基提取緩沖液)結(jié)合使用時(shí),可以快速可靠地制備無基因組DNAgDNA)的細(xì)胞裂解物,用于蛋白質(zhì)印跡或免疫沉淀。gDNA污染是變性緩沖液的一個(gè)重要問題,變性緩沖液可能干擾下游應(yīng)用,如SDS-PAGE中蛋白質(zhì)的免疫沉淀和遷移。與超聲處理或胰島素針gDNA剪切方法不同,BlastR™過濾器可有效去除gDNA污染,同時(shí)對裂解物中蛋白質(zhì)的完整性沒有影響。

產(chǎn)品用途包括

降低樣品粘度

蛋白質(zhì)提取物的快速分離

變性裂解緩沖液提取物的制備

驗(yàn)證數(shù)據(jù):Blaster快速過濾套件白書

示例結(jié)果

BlastR™裂解物gDNA的澄清

A) 將粘性樣品裂解液裝載到BlastR™過濾器上。

B) 樣品通過捕獲gDNA的過濾系統(tǒng)。>細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的回收率為90%。

裝載BlastR™過濾器收集低粘度提取物

BlastR™與常用的非變性和變性裂解緩沖液的比較。從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和細(xì)胞核中分離蛋白質(zhì)。

A431細(xì)胞用BlastR™、RIPA、mPERIP裂解、變性(1%SDS)和萊姆利裂解緩沖液裂解。使用各自的隔室標(biāo)記蛋白來確定從膜、細(xì)胞質(zhì)、線粒體和核標(biāo)記物中分離蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)印跡圖突出了BlastR™緩沖液與其他變性緩沖液類似地從所有細(xì)胞隔室中分離蛋白質(zhì)的能力。與變性緩沖液不同的是,BlastR™緩沖液與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)測定法兼容,這在同等條件下是至關(guān)重要的

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