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產(chǎn)品列表如下：

產(chǎn)品貨號       產(chǎn)品名稱       品牌

01-010   a-GalNAc-PAA-biotin GlycoTech代理 北京華新康信生物科技有限公司 Glycotech中國代理

01-059   Neuca2-6GalNAca-PAA-biotin     GlycoTech代理 北京華新康信生物科技有限公司

01-032 Blood type A (tri)-PAA-biotin     glycotech代理 北京華新康信生物科技有限公司

01-033   Blood type B (tri)-PAA-biotin     glycotech代理 北京華新康信生物科技有限公司

01-035   Lea-PAA-biotin    glycotech代理 北京華新康信生物科技有限公司

01-042 Leb-PAA-biotin    glycotech代理 北京華新康信生物科技有限公司

01-060   H(type 3)-PAA-biotin  glycotech代理 北京華新康信生物科技有限公司

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產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品編號 單位 大小 品牌

HOCH 2（HOCH）4 CH 2 NH-PAA-氟。 03-000   0.4毫克  Glycotech

Add to Shopping Cart單糖

一個 β-D-葡萄糖- PAA-氟。    03-001   0.4毫克  Glycotech     

Add to Shopping Cart  b -D-葡萄糖-PAA-氟。    03-002   0.4毫克 Glycotech

Add to Shopping Cart一個 -D -半乳糖- PAA-氟。      03-003   0.4毫克       Glycotech

Add to Shopping Cart  b -D-半乳糖-PAA-氟 03-004   0.4毫克  Glycotech

Add to Shopping Cart 一個 -D-甘露糖PAA-氟。 03-005   0.4毫克       Glycotech

Add to Shopping Cart 一個 -D-曼-6-磷酸-PAA-氟。  03-006   0.4毫克 Glycotech

Add to Shopping Cart 一個 -L巖藻糖PAA-氟。   03-007   0.4毫克       Glycotech

Add to Shopping Cart一個 -L-鼠李糖，PAA-氟。 03-008   0.4毫克  1個Glycotech     

Add to Shopping Cartb -GlcNAc-PAA-氟。    03-009   0.4毫克  Glycotech

Add to Shopping Cart一個 -GalNAc-PAA-氟。    03-010   0.4毫克       Glycotech

Add to Shopping Cart b -GalNAc-PAA-氟。   03-011   0.4毫克Glycotech      

Add to Shopping Cart一個 -Neuc-PAA-氟。    03-012   0.4毫克       Glycotech

Add to Shopping Cart一個 -Neuc-OCH 2 C ^ 6 ? 4 -p-NHCOOCH 2 -PAA-氟。      03-013   0.4毫克  Glycotech

Add to Shopping Cart MDP-PAA-氟。     03-014   0.4毫克  Glycotech

 

平行板流動室中的動態(tài)流動分析

F低測定允許明確定義的壁剪切應(yīng)力下的細胞粘附的可視化。細胞粘附不同事件的可視化可以通過選擇性圖像采集和后續(xù)圖像處理來量化。流量測定法非常適合研究粘附事件，該事件發(fā)生的時間比大多數(shù)靜態(tài)粘附測定的時間要短。此外，可以研究初始事件之后的事件，例如細胞穩(wěn)定和擴散，從而可以洞悉特定細胞與細胞或細胞與基底之間的粘附行為。

材料：

顯微鏡檢查： 倒置顯微鏡配置用于相襯和熒光操作 物鏡（6.3 x，10 x，40 x） 階段培養(yǎng)箱	生物： 細胞懸浮液（中性粒細胞，癌細胞） 在35毫米培養(yǎng)皿中使用細胞單層或涂層基底 粘附介質(zhì)（不含血清的培養(yǎng)基，含12 mM Hepes） 纖連蛋白（人血漿） 牛血清白蛋白（BSA）
流動室系統(tǒng)： 帶有墊圈和管件的流動室蓋板 35毫米組織培養(yǎng)皿 哈佛注射泵 玻璃注射器可安裝在泵上（3、5、20或60 cc） 硅橡膠管 旋塞 真空泵	電腦/電子產(chǎn)品： 數(shù)字圖像采集與處理系統(tǒng) 顯示監(jiān)視器 錄像機 帶控制器的CCD相機 時間日期生成器 帶有圖像系統(tǒng)接口的計算機 圖像存儲裝置

協(xié)議：

細胞單層制備

1.在每個培養(yǎng)皿中加入1 ml 5.5µg / ml FN溶液，在培養(yǎng)皿上涂人纖連蛋白（FN）。

2.孵育30分鐘。在室溫下。

3.從每個培養(yǎng)皿中吸出溶液。

4. 根據(jù)達到匯合所需的時間，以0.5-3.0 x 10 5個細胞/ ml的接種密度，向每個培養(yǎng)皿中加入2 ml細胞懸液（Huvecs，CHO細胞）。

5. 1-5天后，在流量測定中使用具有融合單層的培養(yǎng)皿。每2-3天喂一次細胞，但通常不要48小時。流量分析。

涂層基材的制備

1.用記號筆在每個培養(yǎng)皿的中心劃出一個涂層區(qū)域（直徑5毫米），以涂覆基材。

2.將20µl含底物的溶液以10µg / ml的濃度添加到涂層區(qū)域。孵育1小時。

3.吸出液體，加20ul 1％BSA封閉1小時。

4.吸出BSA，加入20µl抑制劑1小時。

5.皿已準備就緒，可用于流動分析。

使用平行板流動室進行流動分析

1.打開階段培養(yǎng)箱，將粘附介質(zhì)溫?zé)?7°C 1小時。在開始流量分析之前。

2.組裝將入口，出口和真空管線連接到流動室平臺的流動系統(tǒng)設(shè)備。用介質(zhì)填充系統(tǒng)，并排出系統(tǒng)中的所有空氣。

3.用細胞懸液填充進樣池。對于使用細胞單層的測定，建議使用10 6個 細胞/ ml。對于包被的底物測定，請使用10 5細胞/ ml。

4.保持平臺倒置，將濾杯連接到流動室平臺上，在流路區(qū)域上放置一小片介質(zhì)，然后將35 mm濾杯放置在平臺上。真空將碟子固定在甲板上。確保已連接培養(yǎng)皿，并且流路中沒有氣泡。

5.將組裝好的腔室放在顯微鏡載物臺上。

6.以在0.1-4.0達因/ cm 2的范圍內(nèi)的剪切應(yīng)力開始連接到出口流動室的細胞注射泵的流動。

7.讓細胞流動足夠的時間，以使足夠數(shù)量的細胞與細胞單層或涂層表面相互作用。一般3-10分鐘。用來。

8.開始圖像獲取。在培養(yǎng)皿上的7-10個位置收集圖像。通常，在給定的實驗條件下有3道菜能提供足夠的數(shù)據(jù)，以顯示處理之間的統(tǒng)計差異。

9.在所有培養(yǎng)皿上采集圖像后，進行圖像分析以定量流動分析。

 

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