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CRISPR指導RNA

Edit-R™預設計的指導RNA

保證 編輯靶基因

 

合成sgRNA

一份指南格式-非常適合復雜，難以編輯的單元格類型

 

合成crRNA

適用于大多數(shù)細胞類型的有效編輯-必須與合成tracrRNA一起使用

 

慢病毒sgRNA

對于不適合轉(zhuǎn)染的細胞類型，穩(wěn)定的指導RNA表達

 

多合一慢病毒sgRNA

將sgRNA和Cas9表達整合到單個載體中

 

指導RNA對Cas9核酸酶進行編程以在特定的基因組位置進行切割。有效的指導RNA的設計對于實現(xiàn)有效的基因敲除關(guān)重要。

 

所有Edit-R預先設計的指導RNA產(chǎn)品均采用經(jīng)過驗證的算法進行設計，以大程度地發(fā)揮功能性蛋白敲除的可能性，而不僅僅是產(chǎn)生雙鏈斷裂。通過評估成千上萬個設計的表型，然后在其他分析系統(tǒng)中驗證我們的設計規(guī)則，我們建立了確定目標位點的標準，這些位點更有可能實現(xiàn)高特異性的功能敲除。

 

也可以使用CRISPR設計工具為其他物種，替代核酸酶或基因內(nèi)的任何特定區(qū)域定制合成和慢病毒指導RNA 。對于使用金黃色葡萄球菌Cas9用于切割的設計指南RNA，地平線建議NEB恩根®  秀Cas9您核酸。

 

CRISPR-Cas9系統(tǒng)中的指導RNA

除了表達Cas9核酸酶外，CRISPR-Cas9系統(tǒng)還需要特定的RNA分子來募集核酸酶活性并將其定向到目標區(qū)域。這些指導RNA采取以下兩種形式之一：

 

合成的反式激活CRISPR RNA（tracrRNA）加上合成的CRISPR RNA（crRNA），旨在切割感興趣的基因靶位點（圖1a）

由crRNA和tracrRNA組成的合成或表達的單向?qū)NA（sgRNA）作為單個構(gòu)建體（圖1b）

 

微小RNA（miRNA）

研究microRNA的功能以及它們與miRNA調(diào)節(jié)試劑有關(guān)的途徑。、

 

預先設計的miRNA調(diào)節(jié)試劑

miRIDIAN microRNA模擬物

為功能獲得研究補充內(nèi)源性microRNA活性

 

miRIDIAN microRNA發(fā)夾抑制劑

抑制miRNA活性以研究功能喪失的影響

 

shMIMIC慢病毒微RNA

表達的慢病毒microRNA具有多個啟動子和報告基因選項

 

shMIMIC誘導型慢病毒微RNA

業(yè)界具創(chuàng)新性的成熟microRNA表達系統(tǒng)，結(jié)合一代強大的Tet誘導技術(shù)

 

定制miRNA合成

定制的microRNA調(diào)節(jié)工具

修改現(xiàn)有的microRNA模仿物或抑制劑，靶向新型microRNA，或要求Accell microRNA抑制劑或穩(wěn)定化模仿物用于特殊應用。

 

microRNA調(diào)節(jié)簡介

miRNA是非編碼RNA，可通過一種機制介導轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控，該機制涉及RISC介導的與哺乳動物靶基因3'UTR中互補序列的結(jié)合。miRNA通過不完善的序列互補性與靶向信使RNA（mRNA）結(jié)合，從而導致mRNA不穩(wěn)定和翻譯減弱。由于轉(zhuǎn)錄本的miRNA靶向是通過部分序列互補來指導的，因此每個miRNA都可能調(diào)節(jié)數(shù)百個基因。

 

在獲得功能和喪失功能的實驗中，對miRNA水平的調(diào)節(jié)不僅是了解microRNA功能的方法，也是了解它們可能參與的途徑的基本方法。

 

microRNA模擬

miRIDIAN microRNA模擬物是化學合成的合成雙鏈RNA分子，旨在模擬Dicer加工產(chǎn)生的內(nèi)源性雙鏈體。一鏈代表在miRBase數(shù)據(jù)庫版本21.0中注釋的成熟miRNA 。使用專有的ON-TARGET plus修改可確保僅將所需的成熟鏈加載到RISC中。miRIDIAN microRNA模擬物需要使用類似于siRNA的方法（轉(zhuǎn)染試劑，電穿孔等）遞送到細胞中。人類，小鼠和大鼠中的每種miRNA均可使用單獨的試劑。預定義的篩選庫可用于人類和小鼠?？梢酝ㄟ^我們的定制microRNA網(wǎng)絡工具訂購定制miRNA。在物種可用性，設計標準和添加化學修飾方面提供更大的靈活性。還可以使用Cherry-pick Library Plater生成并訂購自定義的后光線。

 

shMIMIC慢病毒microRNA和shMIMIC慢病毒誘導型microRNA  構(gòu)建體是慢病毒載體，其編碼天然microRNA序列以實現(xiàn)外源導入的microRNA表達?；讷@得專li的SMARTvector慢病毒shRNA平臺，它們針對高功能表達進行了優(yōu)化，并確保鏈偏向，從而僅加載代表成熟miRNA序列的特異性靶向鏈。借助SMARTchoice的額外靈活性啟動子和報道基因的選擇，可以按多種構(gòu)型訂購構(gòu)建體，以確保獲得佳實驗結(jié)果。在miRbase數(shù)據(jù)庫21.0版中，所有人，小鼠和大鼠microRNA的高滴度純化慢病毒顆粒均可以使用單獨的構(gòu)建體；合并的篩選文庫也可用于本構(gòu)  和可誘導  形式的人和小鼠。也可以在此處訂購定制的篩選庫。

 

microRNA抑制劑

將microRNA抑制劑引入生物系統(tǒng)會導致功能喪失分析，并預測內(nèi)源性miRNA功能會下降。miRIDIAN microRNA發(fā)夾抑制劑  是合成的單鏈RNA分子，旨在抑制內(nèi)源性miRNA活性。它們是一代的專有合成抑制劑。正在申請專li的分子結(jié)合了化學修飾和全新的二級結(jié)構(gòu)基序，從而增強了效力和壽命。這允許在非常低的納摩爾濃度下以小的毒性對多重microRNA進行抑制。在miRBase數(shù)據(jù)庫版本21.0中，可為人類，小鼠和大鼠中的每個成熟miRNA提供單獨的試劑。和預定義的抑制劑篩選庫 適用于人類和小鼠。還可以通過使用Cherry-pick Library Plater創(chuàng)建和訂購自定義的后燈。

 

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M-006097-01-0005     KRAS Antibody (Biotin)       Dharmacon

D-001830-01-05  ON-TARGETplus GAPD Control siRNA (Human)       Dharmacon

D-001810-01-05  ON-TARGETplus Non-targeting siRNA    Dharmacon代理 北京華新康信生物科技有限公司

 

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