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產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	品牌
11363735001	Hybridoma Fusion and Cloning Supplement	life-ilab

 

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11363735001 羅氏

雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充

 

 分析證書（COA） 公告（PDF）

貨號(hào)與規(guī)格    庫(kù)存       包裝規(guī)格       安全性

價(jià)格（CNY） 數(shù)量             

11363735001

 

需要從國(guó)外調(diào)貨，預(yù)計(jì)到貨時(shí)間2020年7月6日- 詳情     10毫升  

安全數(shù)據(jù)表   

相關(guān)類別       雜交瘤媒體補(bǔ)充劑， 雜交平臺(tái)， ITS等補(bǔ)品， 無血清培養(yǎng)基， 細(xì)胞培養(yǎng)，

更多...

形成      解

打包      pkg 10毫升（50x）

制造商 沒有。    羅氏

運(yùn)入      干冰

儲(chǔ)存溫度      −20°攝氏度

 

產(chǎn)品描述

一般說明

培養(yǎng)基補(bǔ)充劑，由白蛋白，胰島素，轉(zhuǎn)鐵蛋白，細(xì)胞因子，膽固醇源，其他定義的有機(jī)和無機(jī)化合物以及胎牛血清組成（終濃度：0.5％）。

HFCS包含人類蛋白質(zhì)。已對(duì)從中分離出人類蛋白質(zhì)的原料進(jìn)行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和HIV-1 / 2抗體測(cè)試，發(fā)現(xiàn)呈陰性（根據(jù)當(dāng)前的質(zhì)量控制程序）。

 

應(yīng)用

雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充劑（HFCS）被用作正常培養(yǎng)基的補(bǔ)充劑，以支持融合后和克隆過程中B細(xì)胞雜交瘤的生長(zhǎng)。HFCS替代飼養(yǎng)細(xì)胞。解凍儲(chǔ)存在液氮中的細(xì)胞后，它還可用于優(yōu)化雜交瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。[1] [2]

 

物理形態(tài)

溶液（50x濃縮，pH 7.4）；通過孔徑為0.2μm的膜過濾

 

準(zhǔn)備說明

工作濃度： HFCS（50x）用基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋為1:50（v / v）。強(qiáng)烈建議您使用RPMI1640。終培養(yǎng)基也應(yīng)包含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。

 

分析筆記

生物活性：測(cè)定了雜交瘤細(xì)胞系的高克隆效率。

 

其他注意事項(xiàng)

僅用于生命科學(xué)研究。不可用于診斷。

 

Hybridoma fusion and cloning supplement              （HFCs）（50×）              媒體補(bǔ)編              Solution（50×concentrated）

Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18

Content version: March 2016   10 ml

產(chǎn)品描述              綜述雜交瘤融合和克隆補(bǔ)充（HFCS）是一種              低血清含培養(yǎng)基補(bǔ)充              胎牛血清（FCS）的替代              雜交瘤細(xì)胞。              HFCS是專門為優(yōu)化細(xì)胞生長(zhǎng)而設(shè)計(jì)的              低血清細(xì)胞培養(yǎng)中新融合雜交瘤的篩選和克隆              媒體。              HFCS的特殊組成進(jìn)一步避免了              使用飼養(yǎng)細(xì)胞的必要性。              成分培養(yǎng)基補(bǔ)充劑，包括白蛋白、胰島素，              轉(zhuǎn)鐵蛋白，細(xì)胞因子，膽固醇來源，其他              界定的有機(jī)和無機(jī)化合物與胎兒              小牛血清（終濃度：0.5%）。              HFCS含有人類蛋白質(zhì)。原料來自              人類的蛋白質(zhì)被分離出來              乙肝表面抗原檢測(cè)              （HBsAg）以及HIV-1和HIV-2抗體和              發(fā)現(xiàn)是陰性的。              生物學(xué)的              活動(dòng)              每一批都要進(jìn)行高克隆效率的檢測(cè)              雜交瘤細(xì)胞（見圖1）。              配方•溶液（50×濃度，pH7.4）；              •通過0.2 m孔徑膜過濾；              •內(nèi)毒素（LAL）：10 EU/ml，檢測(cè)支原體              工作              濃度              HFCS濃縮液（50×）用1:50（v/v）稀釋              基本培養(yǎng)基。強(qiáng)烈建議使用RPMI              1640年。終培養(yǎng)基還應(yīng)含有L-谷氨酰胺和

-巰基乙醇。              應(yīng)用HFCS是一種血清替代物，含有FCS和              血清白蛋白、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、細(xì)胞因子、膽固醇源和其他特異性              有機(jī)和無機(jī)化合物。              HFCS避免了血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的額外使用              新融合雜交瘤生長(zhǎng)培養(yǎng)基              源自SP 2/0，P3X63Ag8.653。              HFCS的特殊組成進(jìn)一步避免了              飼養(yǎng)細(xì)胞的使用。新融合的生長(zhǎng)速度              HFCS輔助培養(yǎng)基中的雜交瘤細(xì)胞是              比人內(nèi)皮細(xì)胞要高得多              培養(yǎng)上清液（HECS）-或補(bǔ)充的FCS              中等。雜交瘤HFCS克隆方法的研究              補(bǔ)充培養(yǎng)基比補(bǔ)充培養(yǎng)基更有效率（圖1）。              工具包存儲(chǔ)/              穩(wěn)定性              未開封溶液在1525°C下穩(wěn)定，直到              標(biāo)簽上的有效期。              注：建議配制適當(dāng)?shù)牡确荩苊夥磸?fù)凍融

 

 

程序和所需材料              推薦              媒體              配方              請(qǐng)?jiān)谙卤碇姓业酵扑]的              小鼠源性培養(yǎng)基配方              雜交瘤。              1每種培養(yǎng)基配方可能含有進(jìn)一步的補(bǔ)充劑，例如抗生素、L-谷氨酰胺-              巰基乙醇丙酮酸鈉，非必需              氨基酸。              2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的濃度              介質(zhì)可以通過使用              分離濃縮試劑[補(bǔ)充羥色胺培養(yǎng)基；氨基蝶呤（250×）]。這樣就可以稀釋氨基蝶呤。              3.雜交瘤從含血清培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到無血清培養(yǎng)基              NUTRIDOMA-SP（需要斷奶）（見              備注4）。              4建議將NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0              衍生性雜交瘤。              階躍介質(zhì)配方              高血清1低血清1游離血清1              融合•任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •未來*系統(tǒng)（用于              再懸浮              之后的細(xì)胞              融合）              任何基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如RPMI 1640）              冷凍•含F(xiàn)CS              •10%二甲基亞砜（v/v）              選擇2•任何基礎(chǔ)              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來*系統(tǒng)（v/v）              •10%BM              條件H1              （伏/伏）              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充，1×              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1×HFCS              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充，1×              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1個(gè)NUTRIDOMA-CS              •HAT介質(zhì)補(bǔ)充，1×              篩選•參見選擇              克隆•任何基礎(chǔ)              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來*系統(tǒng)（v/v）              •10%BM              條件H1              （伏/伏）              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1×HFCS              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •1個(gè)NUTRIDOMA-CS              雜交瘤              文化              •任何基底              中等（例如。，              RPMI 1640）              •10%未來*系統(tǒng)3（v/v）              •RPMI 1640型/              DMEM（1:1）              •0.5–1%FCS3              （伏/伏）              •營(yíng)養(yǎng)學(xué)              •RPMI 1640型/              DMEM（1:1）4              •NUTRIDOMASP 1%

 

選擇成功后介紹              陽(yáng)性組織培養(yǎng)上清液已通過第yi次篩選，下一步是克隆              產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。單細(xì)胞克隆確保              產(chǎn)生感興趣抗體的細(xì)胞              單克隆抗體的分泌              保持穩(wěn)定。              單細(xì)胞克隆有幾種方法，例如。，              通過限制稀釋，在軟瓊脂中生長(zhǎng)，流式細(xì)胞術(shù)。              限制稀釋法克隆單細(xì)胞              如下所示。              盡管如此，每一次嘗試都是為了確保              在電鍍之前，電池處于單電池懸浮狀態(tài)              不能保證殖民地不會(huì)出現(xiàn)              從兩個(gè)粘在一起的牢房里。因此，限制性稀釋克隆少應(yīng)該做兩次              （“再克隆”）產(chǎn)生克隆種群。              處理              說明              •如果許多雜交瘤必須同時(shí)克隆              時(shí)間，可能值得用              使用10毫升或更大的吸管。一滴就夠了              吸管將輸送大約100微升。              •克隆將在4天后開始出現(xiàn)，并且應(yīng)該              準(zhǔn)備在第7-10天開始放映。              •可以從包含多個(gè)              克隆體以及僅包含單個(gè)              克隆人。              程序請(qǐng)參考下表。              注：雜交瘤應(yīng)健康迅速              在克隆時(shí)生長(zhǎng)的。

 

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