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內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠 親和層析填料
內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠FF
Endotoxin Removal Reagent Berpharose Fast Flow
1.產(chǎn)品介紹
本公司生產(chǎn)的內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠FF，可以特異去除病毒，核酸和蛋白等樣品中的內(nèi)毒素。本產(chǎn)品具有剛性好，特異性強(qiáng)，載量高，穩(wěn)定性好，樣品回收率高等特點(diǎn)。
國(guó)際公認(rèn)最好的方法就是把某些物質(zhì)偶聯(lián)到瓊脂糖凝膠上做成特異吸附內(nèi)毒素的親和填料，這樣它可以特異吸附內(nèi)毒素，而樣品本身不損失，我們就是把這類物質(zhì)偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠上制備成內(nèi)毒素清除瓊脂糖凝膠FF。
本產(chǎn)品直接加入到樣品中進(jìn)行內(nèi)毒素清除，不必裝柱，使用方便，有效，利于放大生產(chǎn)，此外在使用過(guò)程中配基不脫落，安全可靠，可以重復(fù)使用。 處理后的樣品內(nèi)毒素含量可以小于0.1EU/mg
2.規(guī)格
10ml、25ml、100ml、500ml、1L 使用方法
緩沖液配制：
再生液：1%脫氧膽酸鈉、20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
（稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、脫氧膽酸鈉
5.0g、加注射用水溶解，定容至500ml）
平衡液：20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
（稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、加注射用水
溶解，定容至500ml）

實(shí)驗(yàn)步驟：
再生：用1-2倍填料體積的再生液抽洗，再用3-5倍填料體積的再生液將凝膠充分混勻，
保持 10min。
平衡：用5-10倍填料體積的平衡液，對(duì)填料進(jìn)行平衡，重復(fù)5-10次。
上樣：（1）直接混合法：
①根據(jù)樣品溶液中內(nèi)毒素的含量加入一定量經(jīng)上述預(yù)處理好的填料，于三角瓶中 4℃、150rpm振蕩，直至充分去除內(nèi)毒素。
② 將以上樣品無(wú)菌過(guò)濾，測(cè)內(nèi)毒素含量。
（2）過(guò)柱法：
①將經(jīng)上述預(yù)處理好的填料裝填到色譜柱中
②流速控制在0.25ml/min左右上樣，把流穿的樣品液，再次加入到上樣液中，循環(huán)上樣，直至充分去除內(nèi)毒素。
注：由于有時(shí)候內(nèi)毒素和樣品的結(jié)合，需要較長(zhǎng)時(shí)間去除，因此通常情況下直接混勻法優(yōu)于過(guò)柱法。

5.注意事項(xiàng)：
（1）各操作中樣品、填料接觸到的全部?jī)x器設(shè)備耗材均應(yīng)為無(wú)熱源（無(wú)內(nèi)毒素）。
（2）0.2µm 濾膜要用 0.1M NaOH 浸泡過(guò)夜后，121℃高壓滅菌30min。
（3）脫氧膽酸鈉溶液低溫容易成胨狀，使用時(shí)溫度可以到30℃，避免流不動(dòng)堵柱子或漏斗。
（4）該親和填料每次使用前都需進(jìn)行填料再生步驟。
（5）配制緩沖液要用無(wú)內(nèi)毒素的注射級(jí)用水，配制過(guò)程要防止引入內(nèi)毒素。
（6）適當(dāng)延長(zhǎng)填料與樣品溶液的處理時(shí)間可以加大內(nèi)毒素的吸附量。
（7）如需使用磁力攪拌要注意轉(zhuǎn)速別太快，避免填料顆粒破碎。
（8）樣品如果本身是帶負(fù)性電荷，為增加樣品回收率，樣品中可以加≤0.2M NaCl。
（9）樣品 pH7-9范圍內(nèi)。
（10）樣品內(nèi)毒素太高，超過(guò)填料處理量，需要稀釋樣品找到內(nèi)毒素的范圍，和經(jīng)去除后內(nèi)毒素的范圍對(duì)照，就可以知道效果，如果一次去除不完全，可以重復(fù)，直到合格為止。
（11）本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇，4~8℃。
（12）2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸。
（13）僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。

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