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GST-瓊脂糖凝膠FF GST標(biāo)簽純化 親和層析柱介質(zhì)填料
GST-瓊脂糖凝膠FF

（GST- Berpharose FF）

1.產(chǎn)品介紹

GST-瓊脂糖凝膠FF是一種將谷胱甘肽鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有載量高、非特異性吸附少、流速快等特點(diǎn)，主要用于谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記蛋白（GST融合蛋白）、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽依賴蛋白的分離純化。

2.規(guī)格

1ml（預(yù)裝柱）、5ml（預(yù)裝柱）、10ml（預(yù)裝柱）、20ml、100ml、500ml 使用方法：

①推薦緩沖液:

平衡緩沖液：10 mM PBS（140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3）。

洗脫緩沖液：50 mM Tris-HCl, 10 mM還原型谷胱甘肽（GSH）, pH 8.0

②平衡

用平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)不變。

③上樣

切換轉(zhuǎn)換閥進(jìn)行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，也可進(jìn)行線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量。樣品的預(yù)處理：置換緩沖液，澄清過(guò)濾（0.45μm、0.22μm）等。

④沖洗

用2~3個(gè)柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、pH等參數(shù)不變。此時(shí)未交換的組分將被清洗出去。

⑤洗脫

一般推薦用10 mM還原型谷胱甘肽溶液（可含緩沖成分）進(jìn)行洗脫。

⑥再生

用蒸餾水按操作流速?zèng)_洗3~5個(gè)柱體積，接著用平衡液洗到平衡3~5個(gè)柱體積。再生時(shí)若有失活的蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉，可用在位清洗（CIP）法除去。

⑦在位清洗（CIP）

去除沉淀和變性蛋白：用2個(gè)柱體積的6 M鹽酸胍清洗，立即用10 mM PBS（pH7.4）洗5個(gè)柱體積。去除強(qiáng)疏水蛋白：用3~4個(gè)柱體積的70%乙醇清洗，立即用10 mM PBS（pH7.4）洗5個(gè)柱體積。



6.注意事項(xiàng)：

1）使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果。

2）本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇，4~8℃。

3） 2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸。

4）僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
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