用途:用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)。
成分(g/L):
蛋白胨
| 20.0
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氯化鎂
| 1.4
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硫酸鉀
| 10.0
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瓊脂
| 18.0
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pH值7.4 ± 0.1
| 25℃
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檢驗(yàn)原理:蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化鎂和硫酸鉀促進(jìn)綠膿色素和熒光素的產(chǎn)生;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法:稱取本品 49.4g,另稱取 10g甘油,溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP)中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況:
綠膿菌素生成試驗(yàn)方法及原理:
方法:挑取可疑菌落接種在在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP)斜面上,培養(yǎng)24小時(shí),觀察斜面有無(wú)色素。如有色素,在試管內(nèi)加氯仿3.0~5.0mL,充分震搖,使培養(yǎng)物中的綠膿菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈現(xiàn)綠色時(shí),加1mol/L鹽酸約1mL,震搖后靜置片刻,上層鹽酸溶液中呈現(xiàn)粉紅至紅色實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性,否則為陰性。
原理:銅綠假單胞菌能產(chǎn)生的綠膿菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且會(huì)發(fā)生可逆的氧化還原反應(yīng),氧化時(shí)堿性呈藍(lán)色,酸性呈紅色。所以加入鹽酸溶液并震搖后,綠膿菌素會(huì)由氯仿轉(zhuǎn)移至鹽酸溶液中,并在酸性環(huán)境中呈紅色。
綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP)微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí)。