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所 在 地上海市
更新時間:2023-10-30 12:10:48瀏覽次數(shù):891次
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低密度脂蛋白膽固醇檢測實驗服務(wù)意義:
膽固醇在血液中常以脂蛋白的形式存在 ,而血漿中低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL)是運(yùn)輸內(nèi)源性膽固醇的主要載體,其通過結(jié)合其細(xì)胞膜上的低密度脂蛋白受體(LDL-R) 被降解和轉(zhuǎn)化。低密度脂蛋白膽固醇(Low-Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)是由LDL-C是空腹血漿中的主要脂蛋白,約占血漿脂蛋的2/3,是運(yùn)輸膽固醇到肝外組織的主要運(yùn)載工具 。LDL-R功能缺陷會造成血漿LDL-C的清除能力降低, 終導(dǎo)致動脈內(nèi)膜粥樣斑塊形成。因此,LDL-C的含量與心血管疾病的發(fā)病率及病變程度相關(guān),被認(rèn)為是動脈粥樣硬化的主要致病因子,其濃度與冠心病的發(fā)病率有明顯正相關(guān),也是評價個體冠心病發(fā)生的危險因素的一個重要指標(biāo) 。
低密度脂蛋白膽固醇檢測實驗服務(wù)樣本處理:
①、血清(漿);直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。
②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)1分, 離心10分鐘,取上清測定。
[注|; - -般議細(xì)胞密在100萬個/ml以上。
③、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1: 9的比例,加入9倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清液待測。
④、細(xì)胞樣本:
A.細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)1分,離心10分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;用等滲緩沖液(*0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液)清洗1~2次,同樣1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上液,留細(xì)胞沉淀;
B、細(xì)胞破碎:加入0.2~0.3ml的勻漿介質(zhì)(*0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率: 300W,3~5秒/次,間隔30秒,重復(fù)3~5次)或手動勻漿,制備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解(*TritonX-100,1~2%,裂解30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。
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