過(guò)表達(dá)腺病毒包裝 返回列表頁(yè)

腺病毒（Adenovirus）是直徑約80-120 nm的無(wú)包膜的線性雙鏈DNA病毒，可迅速感染分裂和非分裂期細(xì)胞，與細(xì)胞表面受體結(jié)合后通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞核孔附近聚集，并在感染后2h將腺病毒的DNA釋放到細(xì)胞核中并開始蛋白表達(dá)。通過(guò)對(duì)野生腺病毒進(jìn)行改造，保留包裝信號(hào)序列，去除病毒蛋白的編碼序列，不僅增加外源基因的裝載容量，而且降低細(xì)胞毒性和機(jī)體免疫反應(yīng)，從而獲得安全性更高的基因?qū)胂到y(tǒng)。

腺病毒包裝系統(tǒng)的特點(diǎn)：不整合到宿主細(xì)胞基因組、無(wú)插入致突變性、可進(jìn)行有效擴(kuò)增、獲得高滴度高純度的腺病毒。

腺病毒的優(yōu)勢(shì)

1. 是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的最佳系統(tǒng)：腺病毒感染細(xì)胞后，1-2天即可表達(dá)，是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的最佳系統(tǒng)。

2. 滴度高：腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制，可產(chǎn)生滴度為10¹⁰~10¹¹PFU/mL的病毒。

3. 載體容量大：可容納不超過(guò)5kb的片段。

4. 不整合到染色體中，無(wú)插入致突變性：腺病毒除卵細(xì)胞以外，幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中，因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。