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免疫熒光有直接法和間接法兩種。(1)直接法:將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經(jīng)一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。(2)間接法:如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體與抗原標本進行反應(yīng),用水洗去未反應(yīng)的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應(yīng),使之形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物,再用水洗去未反應(yīng)的標記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為特異抗體,其它步驟的抗原檢查相同。標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性。
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