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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> PI單染法檢測(cè)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。
細(xì)胞周期測(cè)定可以:(1)作為生物相容性評(píng)價(jià)指標(biāo);(2)用于研究細(xì)胞凋亡;(3)作為選擇細(xì)胞的依據(jù)。
細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化,如G0/G1期的DNA含量為2C,而G2期的DNA含量是4C。碘化丙啶( Propidium,簡(jiǎn)稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。假定G0和G1期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為1,那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2,S期的細(xì)胞介于1和2之間。細(xì)胞凋亡時(shí),由于細(xì)胞核皺縮和DNA的片段化,染色時(shí)DNA的片段會(huì)從打孔的細(xì)胞膜處丟失,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),熒光強(qiáng)度小于1,即Sub-G1峰或者凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可分析細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比。
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