免疫熒光(Immunofluorescence , IF)是一項建立在免疫學(xué)、 生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)基礎(chǔ) 上的實驗技術(shù)，依據(jù)抗原、抗體的反應(yīng)原理進行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位,是近代免疫學(xué)的一種重要研究手段。免疫熒光技術(shù)有兩種檢測方法:用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。以熒光抗體方法較常用。
實驗原理
免疫熒光是根據(jù)抗原、抗體的反應(yīng)原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢測細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素。利用熒光顯微鏡觀察樣本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色) ,由此可以觀察熒光所在的細(xì)胞或組織,從而對抗原或抗體進行定性、定位,以及利用定量技術(shù)進行定量。