結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、 彈力纖維、 而膠原纖維( collagen fiber)是分布較廣、含量較多的一種纖維。Masson 三色染色又稱馬松染色,是結(jié)締組織染色的一種方法,是膠原纖維染色經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲遠(yuǎn)有關(guān):分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織。而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色或藍(lán)色,主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson染色實驗流程:
1.切片常規(guī)脫蠟至水。
2、用配制好的Weigert鐵蘇木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化5-15s ，水洗。
4、Masson 藍(lán)化液返藍(lán)3-5min ,水洗。
5、蒸餾水洗1min。
6、麗春紅品紅染色液染色5-10min。
7、在上述操作過程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min.
8、磷鉬酸溶液洗1-2min
9、用配置好的弱酸工作液洗1min。
10、直接放入苯胺藍(lán)染色液中染色1-2min。
11.用配置好的弱酸工作液洗1min。
12.95%乙醇快速脫水。
13、無水乙醇脫水3次。每次5-10s。
14、二甲苯透明3次,每次1-2min。
15、中性樹膠封固。