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內化抗體篩選

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更新時間:2020-05-09 15:10:33瀏覽次數(shù):1596次

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抗體或肽段可與哺乳動物細胞表面的受體特異性結合,通過受體介導的胞吞作用進入到細胞內,此類抗體或抗體片段被稱為內化抗體。內化抗體往往作為一種定向運載藥物、毒素、酶或者DNA的載體,取得廣泛的應用。

 抗體或肽段可與哺乳動物細胞表面的受體特異性結合,通過受體介導的胞吞作用進入到細胞內,此類抗體或抗體片段被稱為內化抗體。內化抗體往往作為一種定向運載藥物、毒素、酶或者DNA的載體,取得廣泛的應用。

  艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供基于絲狀噬菌體和T7λ噬菌體,構建噬菌體展示抗體庫和肽庫,進行內化抗體的高通量篩選服務:

內化抗體篩選;Internalizing Antibody Screening

★ 技術流程:

1. 構建抗某種膜蛋白受體的次級抗體庫;

2. 將新鮮制備的、約1011噬菌體抗體與陰性細胞(膜蛋白受體-)相混合并孵育一定時間,以去除抗體庫中能夠與膜蛋白受體相結合的非特異性抗體;

3. 孵育混合物的上清再與陽性細胞(膜蛋白受體+)共同孵育,用*培養(yǎng)液多次洗滌細胞;

4. 將細胞重懸于適量的培養(yǎng)液中,置于細胞培養(yǎng)箱,適宜溫度下孵育一段時間,讓結合于細胞表面的噬菌體抗體內化;

5. 用緩沖液洗滌細胞,去除未內化但仍結合于細胞上的噬菌體抗體

6. 凍融并超聲破碎細胞,胰酶消化被內化的噬菌體,感染大腸桿菌,進行下一輪的擴增和篩選。

艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供多種受體的內化抗體的篩選服務:EGFR,CTLA4,HER2,CD20,CD3,CD59,CD33等

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