四環(huán)素誘導(dǎo)基因敲除/敲入服務(wù) 返回列表頁

Cre重組酶和L oxP序列。Cre重組酶是一種位點(diǎn)特異性重組酶，能介導(dǎo)兩個LoxP位點(diǎn)(序列)之間的
特異性重組，使L oxP位點(diǎn)間的基因列被刪除或重組。LoxP序列是由兩個13bp反向重腹序列和中間間隔
的8bp列共同組成，8bp的間隔序列同時也確定了LoxP的方向。Cre在催化DNA鏈交換過程中與DNA共
價結(jié)合，13bp的反向重復(fù)例是Cre酶的結(jié)合域。
Cre重組酶介導(dǎo)兩個LoxP位點(diǎn)間的重組是一個動態(tài)、 可逆的過程，可以分成三種情況:
1.如果兩個LoxP位點(diǎn)位于一條DNA鏈上，肪向相桐，Cre重組酶能有效切除兩個LoxP位點(diǎn)間的例;
2.如果兩個LoxP位點(diǎn)位于一條DNA鏈 上，但方向相反，Cre重 組酶能導(dǎo)致兩個LoxP位點(diǎn)間的序列倒位;
3.如果兩個LoxP位點(diǎn)分別位于兩條不同的DNA鏈或染色體上，Cre酶能介導(dǎo)兩條DNA鏈的交換或染色體易.
位。
另外，Cre不僅可以識別LoxP的2個13bp的反向重復(fù)序列和8bp的間隔區(qū)域,而且當(dāng)一個13bp的反向
重復(fù)序列或者8bp的間隔區(qū)發(fā)生改變時仍能識別并發(fā)生重組。利用這一特點(diǎn)， 人們在構(gòu)建載體時可以根據(jù)
要改造L .oxP位點(diǎn)序列，以以于特定的基因突變或修復(fù),增加了該系統(tǒng)的應(yīng)用范圍。
誘導(dǎo)性基因敲除以Cre/loxp系統(tǒng)為基礎(chǔ)，但卻是利用控制Cre表達(dá)的啟動子的活性或所表達(dá)的Cre酶活
性具有可誘導(dǎo)的特點(diǎn)，通過對誘導(dǎo)劑給予時間的控制或利用Cre基因定位表達(dá)系統(tǒng)中載體的宿主細(xì)胞特異
性和將該表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到動物體內(nèi)的過程在時間上的可控性，從而在loxP動物的一 定發(fā)育階段和一定組織
細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)對特定基因進(jìn)行遺傳修飾之目的的基因敲除技術(shù)。常見的幾種誘導(dǎo)性類型如下:四環(huán)素得
型;干擾素導(dǎo)型;激素誘導(dǎo)型;腺病毒介導(dǎo)型。