NCI-H1650人非小細胞肺癌細胞

培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

37.5pg/ml豬圓環(huán)病2型(PCV-2)核檢測試盒(PCR法)JKC-302

0.938ng/ml豬細小病(PPV)核檢測試盒(PCR法)C(GNWHGTAPD)-WVYFAHLNIIW

0.938ng/ml非洲豬瘟（ASFV）核檢測試盒（PCR法）Dynorphin A (1-9)

0.469ng/ml豬肺炎支原體（MHP）核檢測試盒(PCR法）N-Me-Tyr1,N-Me-Arg7,D-Leu-NHEt8)-Dynorphin A (1-8)

37.5pg/ml口蹄疫病通用型(FMDV-U)核檢測試盒(RT-PCR法)Dynorphin A (1-8)

9.375pg/ml口蹄疫病亞洲1型(FMDV-Asia1)核檢測試盒(RT-PCR法)(Phe7)-Dynorphin A (1-7) amide

9.375pg/ml口蹄疫病O型(FMDV-O)核檢測試盒(RT-PCR法)(Phe7)-Dynorphin A (1-7)

9.375pg/ml口蹄疫病A 型(FMDV-A)核檢測試盒(RT-PCR 法)Dynorphin A (1-7)

9.375pg/ml豬藍耳病病通用型(PRRSV-U)核檢測試盒(RT-PCR法)Dynorphin A (1-6)

18.75pg/ml高致病性豬藍耳病病(PRRSV-M)核檢測試盒(RT-PCR法)Dynorphin A
NCI-H1650人非小細胞肺癌細胞人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試盒酰胺培養(yǎng)基

人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試盒膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)膠)

人小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試盒膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)膠)

人小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試盒L-酪氨營養(yǎng)瓊脂配套試

人小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試盒L-酪氨營養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)

人小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試盒Additives Tyrosine Agar

人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試盒Tyrosine Agar Base

人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試盒甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板（MYP）

人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試盒平板

人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試盒甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)MYP