腺病毒A型探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

產(chǎn)品名稱	腺病毒A型探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱	Adenovirus(AV)
貨號(hào)	CP933864

產(chǎn)品特征:

腺病毒A型探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測(cè)方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是腺病毒A型探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

n-去基阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品人B因子(BF)ELISA Kit，48T/96T

阿奇霉素-N-氧化物標(biāo)準(zhǔn)品小鼠B因子(BF)ELISA Kit，48T/96T

偶氮-氨魯米特標(biāo)準(zhǔn)品大鼠B因子(BF)ELISA Kit，48T/96T

氨曲南標(biāo)準(zhǔn)品人抑瘤素M(OSM)ELISA Kit，48T/96T

氨曲南E異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA Kit，48T/96T

開環(huán)氨曲南標(biāo)準(zhǔn)品大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA Kit，48T/96T

鹽酸巴氨西林標(biāo)準(zhǔn)品兔抑瘤素M(OSM)ELISA Kit，48T/96T

桿菌肽標(biāo)準(zhǔn)品人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)

桿菌肽鋅標(biāo)準(zhǔn)品小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)

巴芬標(biāo)準(zhǔn)品大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)

巴芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit，48T/96T

巴柳氮鈉標(biāo)準(zhǔn)品小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit，48T/96T

巴柳氮鈉相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit，48T/96T

巴柳氮鈉相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酸(NADPH)ELISA Kit，48T/96T

酸倍米松標(biāo)準(zhǔn)品人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酸(NADPH)ELISA Kit，48T/96T GRM4/mGluR4  促代謝型谷氨酸受體4抗體山柰酚-3-O-蕓香糖苷

GRM3  促代謝型谷氨酸受體M3抗體4'-去氧基表鬼臼素

GRM2+GRM4  促代謝型谷氨酸受體2+4抗體葫蘆素B

GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2抗體漢黃芩素

GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2抗體松蘿酸

腺病毒A型探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒GRM1  促代謝型谷氨酸受體1抗體7-羥基香豆素

GRK6  G蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體8-姜酚

GRK5  G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體10-姜酚

GRK2/BARK1/ADRBK1  G蛋白偶合受體激酶2抗體石斛堿

GRK1  G蛋白偶合受體激酶1抗體雷公藤內(nèi)酯酮

GRIM19  干擾素/維酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體異阿魏酸

GRGDS(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser)  兔抗粘附多肽抗體刺芒柄花苷

gremlin  骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體沒食子兒茶素

GREB1  乳腺癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體牡荊素葡萄糖苷

GRB2/ASH  生長因子受體結(jié)合蛋白2抗體毛蕊異黃酮

需要自備的器材：

1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研