蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。

產(chǎn)品名稱	蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
英文名稱	Bacillus cereus
貨號	CP933935

產(chǎn)品特征:

蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

拉莫三嗪標(biāo)準(zhǔn)品小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit，48T/96T

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit，48T/96T

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit，48T/96T

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit，48T/96T

乳果糖標(biāo)準(zhǔn)品人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit，48T/96T

乳糖酸標(biāo)準(zhǔn)品馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit，48T/96T

拉米夫定標(biāo)準(zhǔn)品小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit，48T/96T

拉米夫定溶液混合物A標(biāo)準(zhǔn)品大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit，48T/96T

拉米夫定溶液混合物B標(biāo)準(zhǔn)品兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit，48T/96T

羊毛脂標(biāo)準(zhǔn)品人肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA Kit，48T/96T

羊毛脂醇標(biāo)準(zhǔn)品人狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit，48T/96T

蠟樣芽胞桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒蘭素拉唑標(biāo)準(zhǔn)品小鼠狀旁腺激素(PTH)ELISA Kit，48T/96T

蘭素拉唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品大鼠狀旁腺激素(PTH) ELISA Kit，48T/96T

蘭索拉唑雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品駱駝脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA Kit，48T/96T

月桂酸標(biāo)準(zhǔn)品人脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA Kit，48T/96T DSCC1  DSCC1蛋白抗體泛硫胺

DRP3/Dystrobrevin alpha  肌營養(yǎng)蛋白α抗體阿達(dá)帕林

DRK1/Kv2.1  鉀通道蛋白DRK1抗體地雷他定

DRIP1/C14orf28  多巴胺受體相互作用蛋白1抗體福多司坦

DRG1  GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體氨苯酸

Drebrin  腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體鹽酸苯雙胍

DRD5/Dopamine receptor 5  多巴胺受體D5抗體7-表-10去?；仙即?/span>

DRD4  多巴胺受體D4抗體紫杉醇雜質(zhì)A

DRD3  多巴胺受體D3抗體三尖杉寧堿

DRD2  多巴胺受體D2抗體7-表紫杉醇

DRD1  多巴胺受體D1抗體巴芬

DRAM  DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體雌三醇

DRAK2  DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶2抗體曲尼司特

DRAK1/STK17A  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶17A抗體（DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶1）鹽酸伊托必利

DR6/CD358  腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體依普黃酮