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50T-綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒
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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
更新時(shí)間: 2025-01-22 21:00:25
期: 2025年1月22日--2025年7月22日
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

詳細(xì)介紹

需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn):
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒

英文名稱

Brucella ovis

貨號(hào)

CP934000


產(chǎn)品特征:

綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,產(chǎn)品僅用于科研使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是
綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:

鹽酸他克林標(biāo)準(zhǔn)品人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit,48T/96T

他克莫司標(biāo)準(zhǔn)品小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit,48T/96T

他克莫司相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit,48T/96T

他克莫司系統(tǒng)適用性混合物對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品人硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA Kit,48T/96T

西力士標(biāo)準(zhǔn)品人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit,48T/96T

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他布比妥標(biāo)準(zhǔn)品大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit,48T/96T

鹽酸坦索羅辛標(biāo)準(zhǔn)品人生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA Kit,48T/96T

鹽酸坦索羅辛外消旋化合物標(biāo)準(zhǔn)品小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA Kit,48T/96T

消旋蛋氨酸標(biāo)準(zhǔn)品豬生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA Kit,48T/96T

枸櫞酸他莫昔芬標(biāo)準(zhǔn)品大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA Kit,48T/96T

綿羊布魯氏菌探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒單寧酸標(biāo)準(zhǔn)品人基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T

左旋酒石酸標(biāo)準(zhǔn)品小鼠基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T

牛磺酸標(biāo)準(zhǔn)品大鼠基化酶(Methylase)ELISA Kit,48T/96T

他唑巴坦酸標(biāo)準(zhǔn)品人細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體磺胺嘧啶

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體炔諾孕酮

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體萘醌

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子-1抗體巰咪唑

CD54/ICAM-1  細(xì)胞間粘附分子1抗體氧芐啶

CD5  CD5抗體己酸羥孕酮

CD48/SLAMF2  CD48抗體己烯雌酚

CD47/MER6  整合素相關(guān)蛋白CD47枸櫞酸米芬

CD46/MCP (human)  膜輔蛋白抗體(人)磺酸雙麥角堿

CD46/MCP  膜輔蛋白抗體克霉唑

CD45RO  CD45RO抗體鄰苯磺酰胺

CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體6-巰基嘌呤

CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體利血平

CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體2--4-硝基苯胺

CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體普噻噸

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