雞貧血病毒探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn)：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

產(chǎn)品名稱	雞貧血病毒探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱	Chicken Anemia Virus(CAV)
貨號(hào)	CP934053

產(chǎn)品特征:

雞貧血病毒探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高：能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng)：采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制，抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好：擴(kuò)增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高：擴(kuò)增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
檢測(cè)方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是雞貧血病毒探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

5--2-三氟氧基苯胺人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA Kit，48T/96T

3,5-二叔基-4-羥基苯酸正十六酯人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA Kit，48T/96T

1,4-二基喹啉酮人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA Kit，48T/96T

2--5-氟苯人未基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA Kit，48T/96T

2-基-4-吡啶硼酸人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA Kit，48T/96T

4,4,4-三氟巴豆酸酯人甘露糖受體(MR)ELISA Kit，48T/96T

4-鄰苯二酰亞氨基環(huán)己酮人甘露糖(Mannose)ELISA Kit，48T/96T

二(3-三氧基硅烷基基)胺人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA Kit，48T/96T

二叔基硅基雙(三氟烷磺酸)人肽聚糖(PG)ELISA Kit，48T/96T

5--2-硝基三氟苯人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA Kit，48T/96T

雞貧血病毒探針法熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒2-基-6-吡啶人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA Kit，48T/96T

(2R)-1-[(9H-芴-9-氧基)羰基]六羥基哌啶-2-酸人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA Kit，48T/96T

6-(1-基氧基)-3-吡啶醛人脫氧尿三酸(DUTP)ELISA Kit，48T/96T

普瑞巴林人重組激活基因1(RAG-1)ELISA Kit，48T/96T

2--1-4-(三氟氧基)苯基酮人重組激活基因2(RAG-2)ELISA Kit，48T/96T BBS5  巴德-畢德綜合征蛋白BBS5抗體蛻皮甾酮

BBC3/PUMA  p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體馬錢苷（番木鱉苷、馬錢素）

BAZ/ACF1  區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體正己酸

Bax  Bax抗體基香酚

Bax  Bax香葉醇

Batroxobin(5H4)  巴曲霉素單克隆抗體鬼臼素

Batroxobin Protein  蛇巴曲酶抗體D-半乳糖醛酸

Batroxobin  蛇蛋白巴曲酶抗體千金藤素

Batroxobin  蛇巴曲酶抗體異亮氨酸

Batroxobin  蛇巴曲酶抗體苯醛

BAT5  白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體卡維

BAT3/BAG6  Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體氧化槐果堿

BASP1/Nap22  腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體白鮮堿

BASC4  乳腺癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體5-羥色胺鹽酸鹽

BarX1  BarX1蛋白抗體烈香杜鵑油