詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Bunostomum trigonocephalum |
貨號 | CP934005 |
產(chǎn)品特征:
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,抑制非特異性擴增 。
重復性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
鹽酸替來他明標準品犬胰島素(INS)ELISA Kit,48T/96T
替米考星標準品兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
馬來酸噻嗎洛爾標準品牛乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit,48T/96T
噻康唑標準品豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA Kit,48T/96T
噻康唑相關(guān)物質(zhì)A標準品大鼠Ⅰ型前膠原(PCⅠ)ELISA Kit,48T/96T
噻康唑相關(guān)物質(zhì)B標準品人流感病A(FLU A)ELISA Kit,48T/96T
噻康唑相關(guān)物質(zhì)C標準品人腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)ELISA Kit,48T/96T
妥布霉素標準品人瘦素受體(LEPR)ELISA Kit,48T/96T
替硝唑標準品人可溶性腫瘤壞死因子受體1(sTNF-R1)ELISA Kit,48T/96T
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒替硝唑相關(guān)物質(zhì)A標準品人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)ELISA Kit,48T/96T
替硝唑相關(guān)物質(zhì)B標準品人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA Kit,48T/96T
鹽酸妥卡尼標準品人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA Kit,48T/96T
二氧化鈦標準品人酸化酰輔酶A(PaCoA)ELISA Kit,48T/96T
DL-α-生育酚標準品人脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA Kit,48T/96T
維生素E醋酸酯標準品人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA Kit,48T/96T CD19 CD19抗體膽石酸
CD184/CXCR4 細胞表面趨化因子受體4抗體地蒽酚
CD177/NB1 嗜中性粒細胞抗原CD177抗體地塞米松
CD172a/SIRP Alpha 信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體東莨菪堿
CD171/NCAM-L1 神經(jīng)細胞粘附分子配體1抗體對苯磺酰胺
CD170/Siglec-5 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體對羥基苯酰胺
CD169/sialoadhesin 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素1抗體奮乃靜
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體酚磺胺
CD168/RHAMM 透明質(zhì)酸介導細胞游走受體抗體格列本脲
CD167b/DDR2 盤狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體10%A晶型苯咪唑
CD166 活化白細胞粘附分子抗體苯咪唑
CD163L1 CD163蛋白樣1抗體6-氧基-2-萘酮
CD163/M130 CD163抗體N-基
CD161c/NK1.1 CD161抗體卡馬西平
CD161 CD161抗體酸咯萘啶
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研