詳細(xì)介紹
人細(xì)胞色素P450英文名稱:Human Cytochrome P450 ELISA kit產(chǎn)品別名:人CYP450 elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human Cytochrome P450 ELISA kit |
貨號 | CS-E3878 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng):
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
載玻片細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Anti-BSA 兔抗牛血清白蛋白抗血清
冰凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds Whole serum 兔抗長爪沙鼠IgG抗血清
石蠟切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Donkey Anti-human IgG Whole serum 驢抗人IgG抗血清
載玻片細(xì)胞βRUNX3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Donkey Anti-rabbit IgG Whole serum 驢抗兔IgG抗血清
冰凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Donkey Anti-Goat IgG Whole serum 驢抗羊IgG抗血清
石蠟切片組織RUNX3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Donkey Anti-Guinea IgG Whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清
細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)比色法定量檢測試盒AGEs (advanced glycosylation end products) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白
細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光定量檢測試盒AGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品
人細(xì)胞色素P450ELISA試劑盒 RUNX3蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒Protein and Peptide 蛋白質(zhì)與多肽
RUNX3蛋白免疫共沉淀分析試盒BSA (bovine serum albumin) 牛血清白蛋白
RUNX3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試盒KLH (keyhole limpet hemocyanin) 血藍(lán)蛋白
細(xì)胞COLLAGEN I蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試盒OVA (ovalbumin) 雞卵白蛋白
載玻片細(xì)胞COLLAGEN I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒THY (thyroglobulin,TG) 狀腺球蛋
冰凍切片組織COLLAGEN I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白
石蠟切片組織COLLAGEN I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Hu Fibrinogen 人纖維蛋白原R-PE–conjugated Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)
R-PE–conjugated Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)C19orf61英文名稱:ACA11人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)免疫試盒
英文名稱:Amyloid Beta 25-35/Beta-Amyloid 25-35化絲裂原活化蛋白激酶激酶3體
Phospho-YAP1(Ser127)英文名稱:TRP12FBXL20蛋白抗體
C19orf77英文名稱:AHA3人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)免疫試盒
英文名稱:Beta-Amyloid 1-42 CT絲裂原活化蛋白激酶激酶5體
YES1英文名稱:TCTN2FBXL15蛋白抗體
C1D英文名稱:Phospho-ATP1A1 (Ser23)人異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)免疫試盒
英文名稱:AFP化絲裂原活化蛋白激酶激酶5體
phospho-YES1 (Tyr426)英文名稱:TBX1FBXL21蛋白抗體
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。