詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Penicillium rugulosum |
貨號(hào) | CP934584 |
產(chǎn)品特征:
皺褶青霉探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測(cè)方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是皺褶青霉探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
化酰膽小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試盒
鹽酸-α-祛痰菜小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試盒
鹽酸毛果蕓香小鼠睪酮(T)ELISA試盒
鹽酸甜菜小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試盒
胰小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試盒
酰-β-基化膽小鼠高敏狀腺素(u-T4)ELISA試盒
?;懶∈蟾呙芏戎鞍啄懝檀?HDL-C)ELISA試盒
異細(xì)胞小鼠高靈敏度促狀腺激素(U-TSH)ELISA試盒
鱆魚(yú)(肉)小鼠高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試盒
小鼠高半胱氨酸(Hcy)ELISA試盒
二氧化硅小鼠肝脂酶(HL)ELISA試盒
基三化硅小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試盒
三硅小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試盒
一氧化硅小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)ELISA試盒
小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試盒醋酸氨瑞林20mg
醋酸倍他米松 Betamethasone987-24-650mg,供HPLC法含量測(cè)定用
皺褶青霉探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒醋酸倍他米松 Betamethasone987-24-650mg,供HPLC法含量測(cè)定用
醋酸巴惟醇酯/二十二碳烯醇酸酯(反-13)/巴惟醇酸酯(C22:1T)醋酸巴惟醇酯/二十二碳烯醇酸酯(反-13)/巴惟醇酸酯(C22:1T),標(biāo)準(zhǔn)品,有證書(shū) ,100mg
醋酸奧曲肽83150-76-920mg,供鑒別與含量測(cè)定用
醋酸奧曲肽83150-76-920mg,供鑒別與含量測(cè)定用
醋酸(γ-亞麻醇)酯/十八碳三烯醇酸酯(順-6,9,12)/ γ-亞麻醇酸酯(C18:3)醋酸(γ-亞麻醇)酯/十八碳三烯醇酸酯(順-6,9,12)/ γ-亞麻醇酸酯(C18:3),標(biāo)準(zhǔn)品,有證書(shū) ,100mg/500mg/1gm
醋酸(14-順-二十三碳烯醇)酯/二十三碳烯醇酸酯(順-14)(C23:1)醋酸(14-順-二十三碳烯醇)酯/二十三碳烯醇酸酯(順-14)(C23:1),標(biāo)準(zhǔn)品,有證書(shū) ,100mg
醋酸(13,16-順-二十二碳二烯醇)酯/二十二碳二烯醇酸酯(順-13,16)(C22:2)醋酸(13,16-順-二十二碳二烯醇)酯/二十二碳二烯醇酸酯(順-13,16)(C22:2),標(biāo)準(zhǔn)品,有證書(shū) ,100mg
促卵泡生成素(FSH)FSH3支/套,0.5ml/支,供免疫測(cè)定用
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn):
1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研