詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人胎盤蛋白13英文名稱:PP13 ELISA Kit產(chǎn)品別名:人PP13 elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | PP13 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3962 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
細胞糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒NKR(Neuromedin B Receptor) 神經(jīng)激肽B受體(抗原)
組織糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒NF-L(Neurofilament triplet L) 低分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)
血液糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試盒NF-M (Neurofilament triplet M) 中分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)
細胞尿素比色法定量檢測試盒NF-H(Neurofilament triplet H) 高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)
組織尿素比色法定量檢測試盒NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)
體液尿素比色法定量檢測試盒NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
人胎盤蛋白13ELISA試劑盒細胞D-葡萄糖激酶法定量檢測試盒 NR2A (Glutamate receptor2A) 谷酸受體(N端抗原)
組織D-葡萄糖激酶法定量檢測試盒 NRP-1(neuropilin-1) 神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)
血液D-葡萄糖激酶法定量檢測試盒 NRP-2(neuropilin-2) 神經(jīng)纖毛蛋白-2(抗原)
體液D-葡萄糖激酶法定量檢測試盒 NSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核小體結(jié)合蛋白1(抗原)
細胞D-葡萄糖氧化法定量檢測試盒 NTP,Neurual thread protein 神經(jīng)絲蛋白(抗原)
組織D-葡萄糖氧化法定量檢測試盒 OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(人源)
血液D-葡萄糖氧化法定量檢測試盒 OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(大、小鼠同源:人源見bs-0606P)
體液D-葡萄糖氧化法定量檢測試盒 OAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3(抗原)
細胞D-乳酸比色法定量檢測試盒 galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原)Bovine PDGFB(platelet-derived growth factor-BB) ELISA Kit
Bovine PDGFB(platelet-derived growth factor-BB) ELISA KitCAPG2英文名稱:CD274人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試盒
英文名稱:C12ORF24P物質(zhì)受體體
SIPA1L2英文名稱:TGM3FSD1蛋白抗體
CDC10英文名稱:B7H4人血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試盒
英文名稱:CNGB1神經(jīng)激肽B受體體
SKAR英文名稱:RNF92卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體
CEP97英文名稱:BACE1人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試盒 英文名稱兔子可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T 200mg
英文名稱:CD153腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因體 ≥98%100TAK
SRPK2英文名稱:TRIM41Prader-Willi綜合征相關(guān)蛋白抗體